C型肝炎ウイルス（HCV）レプリコン細胞における活性化RIG-I経路の回復HCVプロテアーゼ、ポリメラーゼ、および臨床的に関連する濃度でのin vitroでのNS5A阻害剤

持続性C型肝炎ウイルス（HCV）感染の発症は、HCV NS3・4aプロテアーゼ依存性阻害によって媒介される可能性があります。ウイルス感染細胞で二本鎖RNA（dsRNA）が検出されると、宿主の免疫は、I型インターフェロン（α/βインターフェロン[IFN-α/β]）の産生を上方制御することにより抗ウイルス反応を取り付けます。IFN-β刺激装置1（IPS-1）アダプタータンパク質を切断し、IFN-α/βの合成を減少させるHCVカウンター。HCVプロテアーゼ（Telaprevir、Boceprevir、およびTMC435350）、ポリメラーゼ（HCV-796およびVX-222）、およびNS5A（BMS-790052）阻害剤を評価し、IPS-1を介したRIG-Iシグナル伝達を復元する能力を測定する能力を測定しました。 - さまざまな暴露期間後のHCVレプリコンセルでのIFN-βプロモーター活性化を誘発しました。すべての直接作用HCV抗ウイルス剤は、IPS-1のミトコンドリア局在を復元し、HCV複製を阻害することにより7日後にsandaiウイルス誘発IRF3シグナル伝達を救助し、それによりHCV NS3・4aプロテアーゼの豊富さを減少させました。4日間の処理により、HCVプロテアーゼ阻害剤はポリメラーゼ阻害剤ではなく、IPS-1のミトコンドリア局在を回復し、プロテアーゼまたはポリメラーゼ阻害剤処理細胞におけるNS3プロテインの等価レベルの存在下でIFN-βプロモーター活性化を救助しました。in vitroでIRF3を介したシグナル伝達を救助するために必要なHCVプロテアーゼおよびポリメラーゼ阻害剤の濃度は、処理されたHCV患者の血漿でin vivoで観察された範囲の範囲でした。これらの発見は、（I）HCVプロテアーゼ、ポリメラーゼ、およびNS5A阻害剤がウイルス複製を阻害することによりウイルス誘発IRF3シグナル伝達を回復し、NS3プロテアーゼレベルを低下させることができることを示唆しています。臨床的に達成可能な濃度でのIPS-1の媒介切断。

Development of persistent hepatitis C virus (HCV) infection may be mediated by HCV NS3 · 4A protease-dependent inhibition of host innate immunity. When double-stranded RNA (dsRNA) is detected in virus-infected cells, host innate immunity mounts an antiviral response by upregulating production of type I interferons (α/β interferon [IFN-α/β]); HCV counters by cleaving the IFN-β stimulator 1 (IPS-1) adaptor protein, decreasing synthesis of IFN-α/β. We evaluated HCV protease (telaprevir, boceprevir, and TMC435350), polymerase (HCV-796 and VX-222), and NS5A (BMS-790052) inhibitors for the ability to restore IPS-1-mediated Rig-I signaling by measuring Sendai virus-induced IFN-β promoter activation in HCV replicon cells after various exposure durations. All direct-acting HCV antivirals tested restored mitochondrial localization of IPS-1 and rescued Sendai virus-induced IRF3 signaling after 7 days by inhibiting HCV replication, thereby reducing the abundance of HCV NS3 · 4A protease. With 4-day treatment, HCV protease inhibitors, but not polymerase inhibitors, restored mitochondrial localization of IPS-1 and rescued IFN-β promoter activation in the presence of equivalent levels of NS3 protein in protease or polymerase inhibitor-treated cells. The concentrations of HCV protease and polymerase inhibitors needed to rescue IRF3-mediated signaling in vitro were in the range of those observed in vivo in the plasma of treated HCV patients. These findings suggest that (i) HCV protease, polymerase, and NS5A inhibitors can restore virus-induced IRF3 signaling by inhibiting viral replication, thereby reducing NS3 protease levels, and (ii) HCV protease inhibitors can restore innate immunity by directly inhibiting NS3 protease-mediated cleavage of IPS-1 at clinically achievable concentrations.