ペプチドタンパク質または核酸タンパク質結合を監視するための蛍光偏光（FP）アッセイ

蛍光偏光（FP）の手法は、蛍光標識分子が偏光によって励起されると、分子回転速度に反比例する程度の偏光で光を放出するという観察に基づいています。この蛍光の特性は、小さな標識リガンドとより大きなタンパク質との相互作用を測定するために使用でき、直接および競合結合アッセイの基礎を提供します。FPアッセイは、ハイスループット形式に容易に適応でき、広範囲のターゲットに向けられたスクリーンで正常に使用されており、タンパク質タンパク質とタンパク質核酸相互作用の阻害剤のスクリーニングで特に価値があります。パートナーの1人について識別されます。この記事のプロトコルは、このようなペプチドまたはオリゴヌクレオチドの目的のタンパク質への結合を監視するためのFPアッセイの開発に関する一般的な手順について説明しています。Curr。プロトック。Chem Biol。1：1-15。©2009 by John Wiley＆Sons、Inc。

The technique of fluorescence polarization (FP) is based on the observation that when a fluorescently labeled molecule is excited by polarized light, it emits light with a degree of polarization that is inversely proportional to the rate of molecular rotation. This property of fluorescence can be used to measure the interaction of a small labeled ligand with a larger protein and provides a basis for direct and competition binding assays. FP assays are readily adaptable to a high-throughput format, have been used successfully in screens directed against a wide range of targets, and are particularly valuable in screening for inhibitors of protein-protein and protein-nucleic acid interactions when a small binding epitope can be identified for one of the partners. The protocols in this article describe a general procedure for development of FP assays to monitor binding of such a peptide or oligonucleotide to a protein of interest. Curr. Protoc. Chem Biol. 1:1-15. © 2009 by John Wiley & Sons, Inc.