主要なエビアレルゲンペンA 1（トロポミオシン）の定量化のためのマスト細胞ベースの電気化学バイオセンサー

主要なエビアレルゲンペンA 1（トロポミオシン）を定量化し、その免疫グロブリンE（IgE）媒介過敏症を評価するために、新しい細胞ベースの電気化学バイオセンサーが開発されました。I型コラーゲンにカプセル化されたラット好塩基球性白血病（RBL-2H3）マスト細胞は、IgEを介したマスト細胞の感作と活性化を監視するために、自己組織化L-システイン/金ナノ粒子（AUNPSCYS）修飾金電極に固定されました。マスト細胞を刺激するモデル抗原としてのジニトロフェノール - ウシ血清アルブミン（DNP-BSA）の曝露は、抗DNP Ige刺激の脱グラン化を効率的に測定した用量依存的に堅牢で長期にわたる電気化学的インピーダンスシグナルを誘導しました。肥満細胞。次に、このマスト細胞ベースのバイオセンサーを、抗シュリンプトロポミオシンIgE感作を伴うエビアレルゲンの定量化に適用されました。電気化学的インピーダンス分光法（EIS）の結果は、0.5-0.25μgml（-1）の精製エビアレルゲンペンA 1（トロポミオシン）の濃度とともに、0.15μgmLの範囲の精製エビアレルゲンペンA 1（トロポミオシン）の濃度とともに増加することを示しました。（-1）、および電気化学的結果は、β-ヘキソサミニダーゼアッセイと走査型電子顕微鏡形態（SEM）分析によって確認されました。したがって、エビアレルゲンを測定するためのシンプルでラベルのない敏感な方法が提案され、ここで実証され、食物アレルゲン検出と予測のための非常に汎用性の高いバイオセンサーを意味します。

A novel cell-based electrochemical biosensor was developed to quantify major shrimp allergen Pen a 1 (tropomyosin) and to assess its immunoglobulin E (IgE)-mediated hypersensitivity. Rat basophilic leukemia (RBL-2H3) mast cells, encapsulated in type I collagen, were immobilized on a self-assembled l-cysteine/gold nanoparticle (AuNPsCys)-modified gold electrode to monitor IgE-mediated mast cell sensitization and activation. The exposure of dinitrophenol-bovine serum albumin (DNP-BSA), as a model antigen that stimulates mast cells, induced a robust and long-lasting electrochemical impedance signal in a dose-dependent manner which efficiently measured degranulation of anti-DNP IgE-stimulated mast cells. Then this mast cell-based biosensor was applied into quantification for the shrimp allergen with anti-shrimp tropomyosin IgE-sensitization. The electrochemical impedance spectroscopy (EIS) results showed that the impedance value (Ret) increased with the concentration of purified shrimp allergen Pen a 1 (tropomyosin) in range of 0.5-0.25 μg mL(-1) with the detection limit as 0.15 μg mL(-1), and the electrochemical result was confirmed by β-hexosaminidase assay and scanning electron microscopic morphological (SEM) analysis. Thus, a simple, label-free, and sensitive method for the determination of shrimp allergens was proposed and demonstrated here, implying a highly versatile biosensor for food allergen detection and prediction.