L-2,4-ジアミノ酪酸デカルボキシラーゼ活性エンテロバクターaerogenesの1,3-ジアミノプロパンの形成に関与する活性

ポリアミン代謝の通常の微ヤー誘導体である1,3-ジアミノプロパン（DAP）の高い含有量が、エンテロバクターエアロゲンの細胞で観察されています。L-2,4-ジアミノ酪酸（L-DABA）による成長培地の補給は、DAPの産生の増加をもたらしましたが、スケルミジンが補充された場合はそうではありませんでした。これらの観察に基づいて、DAPの生合成経路が評価されました。この細菌は、L-DABAからのDAPの形成を触媒する新しい酵素活性を持っているように見えました。DAPを生成するスペルミジンの酸化的切断の活性の欠如は、DABAデカルボキシラーゼと呼ばれる酵素がこの細菌のDAPの形成に関与していることを示唆しています。酵素は部分的に360倍精製され、いくつかの特性が調べられました。活性の最適なpHは7.75-8.0であり、酵素は41 microMのkm値でピリドキサール5'-リン酸の絶対要件を示しました。L-DABAのKM値は0.32 mmで、L-2,3-ジアミノプロピオン酸、L-エルニチン、L-リジンは、部分精製酵素に対して検出可能な基質活性を示しませんでした。Mg2+とdithiothreitolが酵素を大幅に活性化しました。

High content of 1,3-diaminopropane (DAP), a normally minor derivative of polyamine metabolism, have been observed in cells of Enterobacter aerogenes. Supplementation of the growth medium with L-2,4-diaminobutyric acid (L-DABA) resulted in increased production of DAP, but not if supplemented with spermidine. On the basis of these observations, the biosynthetic route for DAP was evaluated. It has appeared that this bacterium possesses a novel enzyme activity catalysing the formation of DAP from L-DABA. Lack of the activity for oxidative cleavage of spermidine yielding DAP suggests that the enzyme termed DABA decarboxylase is responsible for the formation of DAP in this bacterium. The enzyme was partially purified 360-fold and some properties were examined. The pH optimum for the activity was 7.75-8.0, and the enzyme showed an absolute requirement for pyridoxal 5'-phosphate with the Km value of 41 microM. The Km value for L-DABA was 0.32 mM, and neither L-2,3-diaminopropionic acid, L-ornithine nor L-lysine showed detectable substrate activity towards the partially purified enzyme. Mg2+ and dithiothreitol greatly activated the enzyme.