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標準の光顕微鏡で獲得した画像の脂質液滴サイズと頻度分布の定量化のための簡単なアプローチが開発されました。オイルレッドO染色セル画像は、自由に利用可能なイメージングソフトウェアImageJを使用して、脂質液滴信号にしきい値を付けました。流域アルゴリズムは、個々の脂質液滴の面積を分析することができました。この方法は、グリセロール-3-リン酸デヒドロゲナーゼ活性の低下と脂質液滴サイズマーカーの転写の減少に関連する低いグルコースの利用可能性の低下した3T3-L1脂肪細胞の脂質液滴サイズの減少によって検証されました。このアプローチは、高価で複雑な計装を必要とせずに、標準的な実験装置を使用して簡単に適用できます。
標準の光顕微鏡で獲得した画像の脂質液滴サイズと頻度分布の定量化のための簡単なアプローチが開発されました。オイルレッドO染色セル画像は、自由に利用可能なイメージングソフトウェアImageJを使用して、脂質液滴信号にしきい値を付けました。流域アルゴリズムは、個々の脂質液滴の面積を分析することができました。この方法は、グリセロール-3-リン酸デヒドロゲナーゼ活性の低下と脂質液滴サイズマーカーの転写の減少に関連する低いグルコースの利用可能性の低下した3T3-L1脂肪細胞の脂質液滴サイズの減少によって検証されました。このアプローチは、高価で複雑な計装を必要とせずに、標準的な実験装置を使用して簡単に適用できます。
A simple approach was developed for the quantification of lipid droplet size and frequency distribution in images acquired by standard light microscopy. Oil Red O-stained cell images were thresholded for the lipid droplet signal using the freely available imaging software ImageJ. Watershed algorithms allowed analyzing the area of each individual lipid droplet. The method was validated by the decrease in lipid droplet size of 3T3-L1 adipocytes on lowered glucose availability associated with reduced glycerol-3-phosphate dehydrogenase activity and reduced transcription of lipid droplet size markers. This approach can be easily applied using standard laboratory equipment without requiring expensive and complex instrumentation.
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