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European journal of biochemistry1985Nov04Vol.152issue(3)

アルファルファモザイクウイルスRNAのin vitro翻訳中にリボソームが失速します1

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

植物TRNAの存在下で、アルファルファモザイクウイルスRNA 1の全長翻訳産物は、低mRNA濃度でのみウサギ網状細胞で生成されます。より高いmRNA濃度では、RNA 1の5 '半分に制限されています。高いmRNA濃度では、追加の植物tRNAとグルタミンが翻訳混合物に供給されると、全長生成物を形成できます。対照的に、酵母または子牛の肝臓tRNAの存在下では、アルファルファモザイクウイルスRNA 1の翻訳パターンは常に完全長産物の合成をもたらします。植物TRNAの存在下でのパルスチェースの実験は、RNA 1の5 '半分のいくつかの位置でリボソームが一時停止することを示しています。一時停止時間は、異なる「停止場所」で異なります。タンパク質合成の開始後3時間以上遅延している場合でも、タンパク質合成はグルタミンの添加時に再開されます。小麦生殖またはタバコから精製された1つのtRNA種のみが、RNA 1の完全な長さの翻訳を促進することができます。このtRNAはグルタミンで充電できます。RNA 1のグルタミンコドンの位置の分析は、CAAコドンの位置とリボソームの停止場所との相関を示しています。すべての感覚コドンを含むことが知られているさまざまなRNAが植物TRNAの存在下でウサギ網状細胞溶解物で効率的に翻訳されるため、CAAコドン(他のコドンの場合)は、リボソームの一時停止に責任を負うことはできません。どうやら他の要素は、タンパク質鎖の伸長中に通常のコドンの解読を制限することができます。

植物TRNAの存在下で、アルファルファモザイクウイルスRNA 1の全長翻訳産物は、低mRNA濃度でのみウサギ網状細胞で生成されます。より高いmRNA濃度では、RNA 1の5 '半分に制限されています。高いmRNA濃度では、追加の植物tRNAとグルタミンが翻訳混合物に供給されると、全長生成物を形成できます。対照的に、酵母または子牛の肝臓tRNAの存在下では、アルファルファモザイクウイルスRNA 1の翻訳パターンは常に完全長産物の合成をもたらします。植物TRNAの存在下でのパルスチェースの実験は、RNA 1の5 '半分のいくつかの位置でリボソームが一時停止することを示しています。一時停止時間は、異なる「停止場所」で異なります。タンパク質合成の開始後3時間以上遅延している場合でも、タンパク質合成はグルタミンの添加時に再開されます。小麦生殖またはタバコから精製された1つのtRNA種のみが、RNA 1の完全な長さの翻訳を促進することができます。このtRNAはグルタミンで充電できます。RNA 1のグルタミンコドンの位置の分析は、CAAコドンの位置とリボソームの停止場所との相関を示しています。すべての感覚コドンを含むことが知られているさまざまなRNAが植物TRNAの存在下でウサギ網状細胞溶解物で効率的に翻訳されるため、CAAコドン(他のコドンの場合)は、リボソームの一時停止に責任を負うことはできません。どうやら他の要素は、タンパク質鎖の伸長中に通常のコドンの解読を制限することができます。

In the presence of plant tRNAs the full-length translation product of alfalfa mosaic virus RNA 1 is produced in rabbit reticulocytes only at low mRNA concentration. At higher mRNA concentration translation is restricted to the 5' half of RNA 1. At high mRNA concentration the full-length product can be formed when additional plant tRNA and glutamine are supplied to the translation mixture. In contrast, in the presence of yeast or calf liver tRNA the translation pattern of alfalfa mosaic virus RNA 1 always results in the synthesis of the full-length product. Pulse-chase experiments in the presence of plant tRNAs show that the ribosomes pause at several positions in the 5' half of RNA 1. The pausing time is different at the different 'halting places'. Protein synthesis is resumed upon addition of glutamine, even when the addition is delayed for more than 3 h after the start of protein synthesis. Only one tRNA species, purified from wheat germ or tobacco, could promote full-length translation of RNA 1. This tRNA can be charged with glutamine. Analysis of the position of glutamine codons on RNA 1 shows a correlation between the positions of the CAA codons and the halting places of the ribosomes. The CAA codon (for any other codon) on its own cannot be responsible for the pausing of the ribosomes, since a variety of RNAs, known to contain all sense codons, are translated efficiently in rabbit reticulocyte lysates in the presence of plant tRNAs. Apparently other elements can restrict decoding of normal codons during protein chain elongation.

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