タンパク質染色手順を使用したニトロセルロースフィルター上のタンパク質のマイクロアッセイ

ニトロセルロース（NC）フィルターを使用したタンパク質染料染色手順を利用するタンパク質のシンプルで迅速なマイクロアッセイについて説明します。タンパク質は、均一性を確保するために、「バイオドット」マイクロフィルトレーション装置を使用してNCフィルターに直接結合しました。次に、タンパク質を染料（Ponceau Red 3RまたはAmido Black 10B）で染色し、染色されたタンパク質斑の光学密度を密度計で直接測定しました。光学密度とタンパク質の量の間の良好な直線性は、0.05〜10マイクログラムの範囲で得られました。より多くのサンプル（最大96サンプル）を同時に1.5時間以内にアッセイできます。アミノ酸、糖、還元剤、キレート剤、トリス（ヒドロキシメチル）アミノメタン、デオキシリボ核酸、およびヌクレオチドなどの汚染化学物質は、アッセイを妨害しませんでした。体液中の少量のタンパク質の定量へのアッセイの再現性、pH依存性、および適用について説明します。

A simple and rapid microassay for proteins utilizing the protein dye-staining procedure with a nitrocellulose (NC) filter is described. Proteins were directly bound to an NC filter using the "BIO DOT" microfiltration apparatus to ensure their uniformity. The proteins were then stained with a dye (Ponceau Red 3R or amido black 10B), and the optical density of the stained protein spots was directly measured by a densitometer. A good linearity between the optical density and the amount of protein was obtained in the range 0.05 to 10 micrograms. A larger number of samples (up to 96 samples) could be assayed within 1.5 h simultaneously. Contaminating chemicals, such as amino acids, sugars, reducing agents, chelating agents, tris(hydroxymethyl)aminomethane, deoxyribonucleic acid, and nucleotides, did not interfere with the assay. The reproducibility, pH dependency, and application of the assay to the quantitation of a small amount of proteins in body fluids are discussed.