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T細胞サイトカイン放出アッセイは、感染症の診断に使用されますが、自己免疫性またはアレルギー性疾患ではありません。セリアック病（CD）は、グルテン依存性の腸の炎症と血清学の存在によって診断される一般的なT細胞媒介疾患です。多くの患者は、医療行為の前に食事のグルテンを減らすため、CDと診断することはできません。グルテンフリー食（GFD）で治療されたCD患者の経口グルテンチャレンジは、インターフェロン（IFN）-γ酵素結合免疫スポット（ELISPOT）または主要組織適合性複合体（MHC）クラスIIテトラマーによって測定可能なグルテン反応性T細胞を動員します。HLA-DQ2・5を所有している患者の90％で免疫優性ペプチドは非常に一貫しています。グルテン特異的T細胞を検出するために、全血アッセイを開発することを目指しました。GFDドナーからグルテンチャレンジの前後に血液が収集された後、CD（n = 27、すべてのHLA-DQ2・5（+））があることが確認され、GFDドナーはCD（n = 6 HLA-DQ2・5（+）を持っていないことが確認されました。、11 HLA-DQ2・5（ - ））およびCDのドナーはGFDに従わない（n = 4、すべてHLA-DQ2・5（+））。血漿IFN-γおよびIFN-γ誘導性タンパク質-10（IP-10）は、ペプチドまたはグリアジンとの全血インキュベーション後、酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）によって測定され、IFN-γELISPOTと相関しました。グルテンチャレンジの前にCD細胞アッセイはCD患者とコントロールを区別することはできませんが、グルテンチャレンジ後、全血IFN-γELISAとELISPOTは両方ともHLA-DQ2・5（+）CD患者に対して85％敏感で100％特異的でした;全血IP-10 ELISAは94％に敏感で、100％特異的でした。全血サイトカイン放出アッセイは、CDのグルテン反応性T細胞の検出に敏感で特異的であると結論付けています。CDの不確実な診断を受けた患者のこれらのテストの有用性に対処するさらなる臨床研究が必要です。
T細胞サイトカイン放出アッセイは、感染症の診断に使用されますが、自己免疫性またはアレルギー性疾患ではありません。セリアック病（CD）は、グルテン依存性の腸の炎症と血清学の存在によって診断される一般的なT細胞媒介疾患です。多くの患者は、医療行為の前に食事のグルテンを減らすため、CDと診断することはできません。グルテンフリー食（GFD）で治療されたCD患者の経口グルテンチャレンジは、インターフェロン（IFN）-γ酵素結合免疫スポット（ELISPOT）または主要組織適合性複合体（MHC）クラスIIテトラマーによって測定可能なグルテン反応性T細胞を動員します。HLA-DQ2・5を所有している患者の90％で免疫優性ペプチドは非常に一貫しています。グルテン特異的T細胞を検出するために、全血アッセイを開発することを目指しました。GFDドナーからグルテンチャレンジの前後に血液が収集された後、CD（n = 27、すべてのHLA-DQ2・5（+））があることが確認され、GFDドナーはCD（n = 6 HLA-DQ2・5（+）を持っていないことが確認されました。、11 HLA-DQ2・5（ - ））およびCDのドナーはGFDに従わない（n = 4、すべてHLA-DQ2・5（+））。血漿IFN-γおよびIFN-γ誘導性タンパク質-10（IP-10）は、ペプチドまたはグリアジンとの全血インキュベーション後、酵素結合免疫吸着アッセイ（ELISA）によって測定され、IFN-γELISPOTと相関しました。グルテンチャレンジの前にCD細胞アッセイはCD患者とコントロールを区別することはできませんが、グルテンチャレンジ後、全血IFN-γELISAとELISPOTは両方ともHLA-DQ2・5（+）CD患者に対して85％敏感で100％特異的でした;全血IP-10 ELISAは94％に敏感で、100％特異的でした。全血サイトカイン放出アッセイは、CDのグルテン反応性T細胞の検出に敏感で特異的であると結論付けています。CDの不確実な診断を受けた患者のこれらのテストの有用性に対処するさらなる臨床研究が必要です。
T cell cytokine release assays are used to diagnose infectious diseases, but not autoimmune or allergic disease. Coeliac disease (CD) is a common T cell-mediated disease diagnosed by the presence of gluten-dependent intestinal inflammation and serology. Many patients cannot be diagnosed with CD because they reduce dietary gluten before medical workup. Oral gluten challenge in CD patients treated with gluten-free diet (GFD) mobilizes gluten-reactive T cells measurable by interferon (IFN)-γ enzyme-linked immunospot (ELISPOT) or major histocompatibility complex (MHC) class II tetramers. Immunodominant peptides are quite consistent in the 90% of patients who possess HLA-DQ2·5. We aimed to develop whole blood assays to detect gluten-specific T cells. Blood was collected before and after gluten challenge from GFD donors confirmed to have CD (n = 27, all HLA-DQ2·5(+) ), GFD donors confirmed not to have CD (n = 6 HLA-DQ2·5(+) , 11 HLA-DQ2·5(-) ) and donors with CD not following GFD (n = 4, all HLA-DQ2·5(+) ). Plasma IFN-γ and IFN-γ inducible protein-10 (IP-10) were measured by enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) after whole blood incubation with peptides or gliadin, and correlated with IFN-γ ELISPOT. No T cell assay could distinguish between CD patients and controls prior to gluten challenge, but after gluten challenge the whole blood IFN-γ ELISA and the ELISPOT were both 85% sensitive and 100% specific for HLA-DQ2·5(+) CD patients; the whole blood IP-10 ELISA was 94% sensitive and 100% specific. We conclude that whole blood cytokine release assays are sensitive and specific for detection of gluten-reactive T cells in CD; further clinical studies addressing the utility of these tests in patients with an uncertain diagnosis of CD is warranted.
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