DNAトランストランスケースFANCM/MHFは、DNAインターストランド架橋の複製トラバースを促進します

複製された機械は多くの障害に遭遇しますが、その一部は病変バイパスまたは複製の再起動経路によって克服され、後で修復を残します。ただし、DNAの巻き戻しを排除する鎖間架橋（ICL）は、複製の絶対ブロックと見なされます。現在のモデルは、ICLの片側または両側からのフォークの衝突が、複製の再開に必要な修理プロセスを開始することを示唆しています。これらの提案をテストするために、ICLが生細胞で発生するときにICLを使用した複製フォークの遭遇を視覚化するための単一分子技術を開発しました。驚くべきことに、最も頻繁なパターンは、病変の修復なしで、ICLの複製トラバースと一致していました。トラバース周波数は、FANCM/MHF複合体のトランスリカーゼおよびDNA結合活性の不活性化により大幅に減少しました。結果は、トランスケースベースのメカニズムにより、DNA合成が過去のICLを継続できること、およびこれらの病変が必ずしも複製の絶対ブロックではないことを示しています。

The replicative machinery encounters many impediments, some of which can be overcome by lesion bypass or replication restart pathways, leaving repair for a later time. However, interstrand crosslinks (ICLs), which preclude DNA unwinding, are considered absolute blocks to replication. Current models suggest that fork collisions, either from one or both sides of an ICL, initiate repair processes required for resumption of replication. To test these proposals, we developed a single-molecule technique for visualizing encounters of replication forks with ICLs as they occur in living cells. Surprisingly, the most frequent patterns were consistent with replication traverse of an ICL, without lesion repair. The traverse frequency was strongly reduced by inactivation of the translocase and DNA binding activities of the FANCM/MHF complex. The results indicate that translocase-based mechanisms enable DNA synthesis to continue past ICLs and that these lesions are not always absolute blocks to replication.