淡水で活性細菌を検出するフルオレセインジアセテートの適用可能性

フルオレセインジアセテート（FDA）加水分解は、淡水中の活発に代謝性の細菌を検出する手段として評価されました。フルオレセインの非蛍光誘導体であるフルオレセインジアセテートは、細胞膜を横切って輸送し、非特異的なエステラーゼによって脱アセチル化できます。結果として生じるフルオレセインは、細胞内に蓄積し、過蛍光顕微鏡による直接的な視覚化を可能にします。さまざまな淡水生息地にFDAを適用すると、総人口の6〜24％の範囲の活性細胞の推定値が得られました。これらの推定値は、電子輸送活性の測定から得られた活性細胞の推定値よりも49〜61％低かった。この違いは、従属栄養グラム陰性細胞の外膜を介した蛍光物質の透過性が低いことに起因していました。データは、活性細菌を検出する手段としてのFDA加水分解が、ユーカリオテスとグラム陽性細胞が豊富な環境に限定される可能性があることを示唆しています。

Fluorescein diacetate (FDA) hydrolysis was evaluated as a means to detect actively metabolizing bacteria in freshwater. Fluorescein diacetate, a nonfluorescent derivative of fluorescein, can be transported across cell membranes and deacetylated by nonspecific esterases. Resultant fluorescein accumulates within cells and allows direct visualization by epifluorescent microscopy. Application of FDA to a variety of freshwater habitats yielded estimates of active cells ranging from 6-24% of the total population. These estimates were 49-61% lower than estimates of active cells obtained from measures of electron transport activity. The difference was attributed to low permeability of the fluorogen through the outer membrane of heterotrophic gram-negative cells. Data suggest that FDA hydrolysis as a means of detecting active bacteria may be limited to environments rich in eucaryotes and gram-positive cells.