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Avena sativa L. poly（エチレネイミン）のクロロフィルシュートからのフィトクロムの抽出と塩分別の方法は、クロロフィルを減らし、フィトクロム濃度を十分に増加させるために使用され、スペクトルおよび免疫化学分析を可能にします。このフィトクロムの光変換の差スペクトルは、差分スペクトルの赤い領域の最大値が約15 nmにシフトして短い波長にシフトするという点で、エチオレートシュートからフィトクロムの光変換スペクトルとは異なります。50 pgに敏感な方法を使用して、エレクトロブロットされたタンパク質（ウエスタンブロッティング）の免疫化学プロービングは、抗ヒトクロム抗体を結合する緑色組織に2つのポリペプチドが存在することを示しています。124000-Mr polypeptide.Under nondenaturing conditions all of the 124000-Mr species is immunoprecipitable, but the 118000-Mr species remains in the supernatant.モノクローナル抗体を用いたペプチドマッピングと免疫化学分析は、118000-MR種がエチオレートオーツフィトクロムとは異なる構造的特徴を持っていることを示しています。混合実験は、これらの構造の違いが、植物化後の修飾または緑組織抽出物の干渉物質の結果ではなく、これら2つの組織からの分子種に固有のものであることを示しています。一緒にデータは、緑組織で優勢であるフィトクロムが、エチオール化された組織からのよく特徴の分子とは異なるポリペプチドを持っていることを示しています。
Avena sativa L. poly（エチレネイミン）のクロロフィルシュートからのフィトクロムの抽出と塩分別の方法は、クロロフィルを減らし、フィトクロム濃度を十分に増加させるために使用され、スペクトルおよび免疫化学分析を可能にします。このフィトクロムの光変換の差スペクトルは、差分スペクトルの赤い領域の最大値が約15 nmにシフトして短い波長にシフトするという点で、エチオレートシュートからフィトクロムの光変換スペクトルとは異なります。50 pgに敏感な方法を使用して、エレクトロブロットされたタンパク質（ウエスタンブロッティング）の免疫化学プロービングは、抗ヒトクロム抗体を結合する緑色組織に2つのポリペプチドが存在することを示しています。124000-Mr polypeptide.Under nondenaturing conditions all of the 124000-Mr species is immunoprecipitable, but the 118000-Mr species remains in the supernatant.モノクローナル抗体を用いたペプチドマッピングと免疫化学分析は、118000-MR種がエチオレートオーツフィトクロムとは異なる構造的特徴を持っていることを示しています。混合実験は、これらの構造の違いが、植物化後の修飾または緑組織抽出物の干渉物質の結果ではなく、これら2つの組織からの分子種に固有のものであることを示しています。一緒にデータは、緑組織で優勢であるフィトクロムが、エチオール化された組織からのよく特徴の分子とは異なるポリペプチドを持っていることを示しています。
A method is described for the extraction of phytochrome from chlorophyllous shoots of Avena sativa L. Poly(ethyleneimine) and salt fractionation are used to reduce chlorophyll and to increase the phytochrome concentration sufficiently to permit spectral and immunochemical analyses. The phototransformation difference spectrum of this phytochrome is distinct from that of phytochrome from etiolated shoots in that the maximum in the red region of the difference spectrum is shifted about 15 nm to a shorter wavelength. Immunochemical probing of electroblotted proteins (Western blotting), using a method sensitive to 50 pg, demonstrates the presence of two polypeptides in green tissue that bind antiphytochrome antibodies: a predominant species with a relative molecular mass (Mr) of 118000 and a lesser-abundant 124000-Mr polypeptide. Under nondenaturing conditions all of the 124000-Mr species is immunoprecipitable, but the 118000-Mr species remains in the supernatant. Peptide mapping and immunochemical analysis with monoclonal antibodies show that the 118000-Mr species has structural features that differ from etiolated-oat phytochrome. Mixing experiments show that these structural differences are intrinsic to the molecular species from these two tissues rather than being the result of post-homogenization modifications or interfering substances in the green-tissue extracts. Together the data indicate that the phytochrome that predominates in green-tissue has a polypeptide distinct from the well-characterized molecule from etiolated tissue.
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