液体クロマトグラフィー - エレクトロスプレータンデム質量分析によるヒト血漿中のデキストロメトルファン、デキストルファンおよびクロルフェナミンの同時定量分析

ヒト血漿中のデキストロメトルファン、デキストルファン、クロルフェナミンの同時測定のために、敏感で正確なHPLC-MS/MSメソッドが開発されました。酢酸エチルを使用した液液抽出により血漿から3つの分析物を抽出し、0.2 mL/minの流量でのアセトニトリル水の移動相（0.1％形成酸を含む）の移動相（50：50、v/v）を含むクロマシル60-5CNカラム（3 µM、2.1×150 mm）で分離しました。陽性エレクトロスプレーイオン化を使用した複数の反応モニタリングモードで、トリプル四重極タンデム質量分析計で定量化を実施しました。キャリブレーション曲線は、デキストロメトルファンで0.01-5 ng/mlの範囲で線形であり、デキストルファンでは0.02-5 ng/ml、クロルフェナミンで0.025-20 ng/mlでした。Dextromethorphan、Dextrorphan、およびクロルフェナミンの定量化の下限は、それぞれ0.01、0.02および0.025 ng/mlでした。日中および日中の精度は11％以内であり、精度は92.9-102.5％の範囲でした。すべての分析物は、サンプル保存、準備、分析手順中に安定していることが証明されました。この方法は、最初に、デキストロメトルファン水臭化物（18 mg）とクロルフェニラミンマレアーテ（8 mg）を含む製剤の1回の経口用量の後、健康な中国のボランティアの薬物動態研究に最初に適用されました。

A sensitive and accurate HPLC-MS/MS method was developed for the simultaneous determination of dextromethorphan, dextrorphan and chlorphenamine in human plasma. Three analytes were extracted from plasma by liquid-liquid extraction using ethyl acetate and separated on a Kromasil 60-5CN column (3 µm, 2.1 × 150 mm) with mobile phase of acetonitrile-water (containing 0.1% formic acid; 50:50, v/v) at a flow rate of 0.2 mL/min. Quantification was performed on a triple quadrupole tandem mass spectrometer in multiple reaction monitoring mode using positive electrospray ionization. The calibration curve was linear over the range of 0.01-5 ng/mL for dextromethorphan, 0.02-5 ng/mL for dextrorphan and 0.025-20 ng/mL for chlorphenamine. The lower limits of quantification for dextromethorphan, dextrorphan and chlorphenamine were 0.01, 0.02 and 0.025 ng/mL, respectively. The intra- and inter-day precisions were within 11% and accuracies were in the range of 92.9-102.5%. All analytes were proved to be stable during sample storage, preparation and analytic procedures. This method was first applied to the pharmacokinetic study in healthy Chinese volunteers after a single oral dose of the formulation containing dextromethorphan hydrobromide (18 mg) and chlorpheniramine malaeate (8 mg).