連鎖球菌を検出するための迅速で信頼性の高いループ媒介等温増幅方法

Streptococcus Agalactiae（グループB Streptococcus、GBS）は、新生児敗血症と髄膜炎の主な原因であり、高齢患者および根底にある疾患のある患者の重要な病原体です。GBS感染症の診断は、主にGBSの培養に基づいています。一部の臨床研究所は、他の連鎖球菌からのGBSの識別のために、Christie-Atkins-Munch-Peterson（CAMP）テストを実施しています。ここでは、cAMP因子をコードするCFB遺伝子を検出するための迅速なGBS識別法、つまりループを介した等温増幅（LAMP）方法を開発しました。この方法は、等温条件下でGBSのCFB遺伝子の少なくとも4つのコピーが短時間（65°C、90分以内）で検出されました。この方法によるヌクレオチドの不適切な増幅は、17の連鎖球菌および腸球菌種の染色体DNAがテンプレートとして使用された場合に観察されませんでした。この調査では、GBSの迅速かつ高感度の検出のためのLAMPメソッドの開発に成功しました。これは、従来のキャンプテストの有益な代替品を提供します。

Streptococcus agalactiae (group B Streptococcus, GBS) is the leading cause of neonatal sepsis and meningitis and an important pathogen in elderly patients and those with underlying diseases. The diagnosis of GBS infections is primarily based on culture of GBS. Some clinical laboratories perform the Christie-Atkins-Munch-Peterson (CAMP) test for discrimination of GBS from other streptococci. Here, we developed a rapid GBS identification method, i.e., the loop-mediated isothermal amplification (LAMP) method for detecting the cfb gene encoding the CAMP factor. This method detected at least 4 copies of the cfb gene in GBS under isothermal conditions with in a short time (65 °C, within 90 min). No inappropriate amplification of nucleotide by this method was observed when the chromosomal DNA of 17 streptococci and enterococci species, other than GBS, were used as templates. In this investigation, we successfully developed a LAMP method for rapid and highly sensitive detection of GBS, which provides a beneficial alternative to the conventional CAMP test.