フィトクロムアポタンパク質の細胞合成

単一のポリペプチドは、オート麦（Avena sativa L.）Poly（A）RNAでプログラムされた小麦とウサギ - 網状細胞のないタンパク質合成システムの両方の総翻訳産物からの単一特異的アンチテトクロムによって免疫学的に沈殿します。このポリペプチドの可動性は、免疫親和性培養型、118 kdaltonフィトクロムのそれよりも、ドデシル硫酸ナトリウム（SDS）ポリアクリルアミドゲル電気泳動でわずかに低く、124 Kdaltonの見かけの分子量に対応しています。この移動性の違いが、124-KDALTONタンパク質の細胞内処理に起因する可能性に対する証拠は、凍結乾燥組織の抽出が沸騰したSDS含有バッファーに直接提供されることにより提供されます。この手順は、SDSポリアクリルアミドゲル電気泳動の可動性を備えたフィトクロム種を、in in-in-vitro翻訳製品のそれと区別できないものにします。データは、フィトクロムポリペプチドが細胞内で成熟した形で合成されているが、免疫積分中に見かけの分子量が少ない形態に修飾されることを示しています。

A single polypeptide is immunospecifically precipitated by monospecific antiphytochrome from the total translation products of both wheat-germ and rabbit-reticulocyte cell-free protein synthesizing systems programmed with oat (Avena sativa L.) poly(A) RNA. The mobility of this polypeptide is slightly lower on sodium dodecyl sulfate (SDS) polyacrylamide gel electrophoresis than that of immunoaffinity-purified, 118 kdalton phytochrome and corresponds to an apparent molecular weight of 124 kdalton. Evidence against the possibility that this mobility difference results from intracellular processing of the 124-kdalton protein is provided by extraction of freeze-dried tissue directly into boiling SDS-containing buffer. This procedure yields a phytochrome species with a mobility on SDS polyacrylamide gel electrophoresis indistinguishable from that of the in-vitro translation product. Together the data indicate that the phytochrome polypeptide is synthesized in its mature form in the cell but is subject to modification to a form with lower apparent molecular weight during immunopurification.