ヒト二倍体線維芽細胞のin vitro寿命に対する5-アザシチジンの強い効果

アザシチジン（5-AZA-CR）およびアザデオキシシチジン（5-AZA-CDR）は、DNAにおけるシトシン（5-MC）のメチル化を阻害することが知られています。また、ヒト線維芽細胞の長期成長に対する効果は、MRC-5を株することが知られています。、調べられました。いずれかのアナログを使用した単一の治療は、最初に成長を阻害しますが、細胞は合流点で正常な形態、成長速度、細胞密度に回復します。ただし、細胞の後続の寿命はコントロールと比較して大幅に減少し、成長の末端段階は未処理細胞の老化培養と区別できないため、治療の記憶が保持されます。5-aza-crまたは5-aza-cdrの効果は、使用される濃度、または総寿命の約半分までの治療の長さと密接に関連していないようです。連続した用量は、寿命に累積的な影響を及ぼします。哺乳類DNAの5-MCのパターンが細胞分裂を介して継承されるという証拠があります。したがって、5-aza-crまたは5-aza-CDRのパルス処理によって誘導される5 mcの減少は、すべての子孫に送信されます。結果は、ヒト二倍体細胞の連続サブカルチャー中に5-MCのレベルが継続的に低下するという独立した観察と一致しています。類似体は、この衰退を引き起こし、それによって培養の生理学的年齢を前進させると予想されます。この結果は、DNAにおけるメチル基のランダムな喪失が、遺伝子発現の異常なエピジェネティックな変化など、最終的に有害な結果をもたらす可能性があるという見解をサポートしています。

Azacytidine (5-aza-CR) and azadeoxycytidine (5-aza-CdR) are known to inhibit the methylation of cytosine (5-mC) in DNA, and their effects on the long-term growth of human fibroblasts, strain MRC-5, have been examined. A single treatment with either analogue initially inhibits growth, but the cells recover to normal morphology, growth rate and cell density at confluence. However, a memory of the treatment is retained, since the cells' subsequent lifespan is considerably reduced in comparison with controls, and the terminal stages of growth are indistinguishable from senescent cultures of untreated cells. The effect of 5-aza-CR or 5-aza-CdR does not appear to be closely related to the concentration used, or to the length of treatment up to about half-way through the total lifespan. Sequential doses have cumulative effects on longevity. There is evidence that the pattern of 5-mC in mammalian DNA is inherited via cell division; therefore, a reduction in 5-mC induced by a pulse treatment of 5-aza-CR or 5-aza-CdR will be transmitted to all descendants. The results are consistent with independent observations that the level of 5-mC declines continually during the serial subculture of human diploid cells. The analogues would be expected to precipitate this decline and thereby advance the physiological age of the culture. The results provide support for the view that the random loss of methyl groups in DNA may eventually have deleterious consequences, such as aberrant epigenetic changes in gene expression.