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はじめに:間葉系幹細胞(MSC)は、関節リウマチ(RA)における有望な用途を表しています。ただし、RA滑膜の炎症性ニッチは、MSC機能に悪影響を与える可能性があります。この研究は、RAの滑膜由来MSC(SMSC)の生物学的および免疫学的特性を調査するように設計されました。特に、サイトカインがRAのSMSCと共培養されたT細胞の増殖の増加を媒介できるかどうかに焦点を当てています。 方法:8人の健康なドナー(HDS)のSMSCと比較して、RA(RAP)の22人の患者からのSMSCを評価しました。メチルチアゾリルテトラゾリウム(MTT)アッセイを使用して、細胞人口の倍増と生存率を評価しました。SMSCの多能性は、適切な培養条件を使用して調べられました。フローサイトメトリーを使用して、SMSCのマーカー表現型を調査しました。SMSCの免疫調節能は、混合末梢血単核細胞(PBMCS)反応、および炎症性サイトカイン(Interleukin-17A(IL-17A)、腫瘍壊死因子-α(TNFα)の添加の有無にかかわらず、PBMCまたは滑膜T細胞によって検査されました。-α)、および植物ヘマグルチニン(PHA)による刺激後のインターフェロン-γ(IFN-γ))。 結果:RA患者(RA-SMSC)のSMSCは、正常な集団の倍増、細胞生存率、複数の分化特性、および表面マーカーを示しました。PHAで刺激された混合PBMC反応またはPBMC増殖のいずれかで、RA-SMSCは健康なドナー(HD-SMSC)のSMSCと比較して正常な免疫調節機能を示しました。ただし、IL-17AとTNF-αを単独または組み合わせて添加すると、T細胞の増殖の増加が観察されました。 結論:我々のデータは、炎症性ニッチ、特にこれらのサイトカインが、RAのSMSCと共培養されたT細胞の増殖を増加させる可能性があることを示唆しています。
はじめに:間葉系幹細胞(MSC)は、関節リウマチ(RA)における有望な用途を表しています。ただし、RA滑膜の炎症性ニッチは、MSC機能に悪影響を与える可能性があります。この研究は、RAの滑膜由来MSC(SMSC)の生物学的および免疫学的特性を調査するように設計されました。特に、サイトカインがRAのSMSCと共培養されたT細胞の増殖の増加を媒介できるかどうかに焦点を当てています。 方法:8人の健康なドナー(HDS)のSMSCと比較して、RA(RAP)の22人の患者からのSMSCを評価しました。メチルチアゾリルテトラゾリウム(MTT)アッセイを使用して、細胞人口の倍増と生存率を評価しました。SMSCの多能性は、適切な培養条件を使用して調べられました。フローサイトメトリーを使用して、SMSCのマーカー表現型を調査しました。SMSCの免疫調節能は、混合末梢血単核細胞(PBMCS)反応、および炎症性サイトカイン(Interleukin-17A(IL-17A)、腫瘍壊死因子-α(TNFα)の添加の有無にかかわらず、PBMCまたは滑膜T細胞によって検査されました。-α)、および植物ヘマグルチニン(PHA)による刺激後のインターフェロン-γ(IFN-γ))。 結果:RA患者(RA-SMSC)のSMSCは、正常な集団の倍増、細胞生存率、複数の分化特性、および表面マーカーを示しました。PHAで刺激された混合PBMC反応またはPBMC増殖のいずれかで、RA-SMSCは健康なドナー(HD-SMSC)のSMSCと比較して正常な免疫調節機能を示しました。ただし、IL-17AとTNF-αを単独または組み合わせて添加すると、T細胞の増殖の増加が観察されました。 結論:我々のデータは、炎症性ニッチ、特にこれらのサイトカインが、RAのSMSCと共培養されたT細胞の増殖を増加させる可能性があることを示唆しています。
INTRODUCTION: Mesenchymal stem cells (MSCs) represent promising applications in rheumatoid arthritis (RA). However, the inflammatory niche in the RA synovium could adversely affect MSC function. This study was designed to investigate biologic and immunologic properties of synovium-derived MSCs (SMSCs) in RA, with particular focus on whether cytokines can mediate increase of proliferation of T cells cocultured with SMSCs in RA. METHODS: Compared with SMSCs from eight healthy donors (HDs), SMSCs from 22 patients with RA (RAp) were evaluated. The methyl thiazolyl tetrazolium (MTT) assay was used to assess cell-population doubling and viability. Multipotentiality of SMSCs was examined by using appropriate culture conditions. Flow cytometry was used to investigate the marker phenotype of SMSCs. Immunomodulation potential of SMSCs was examined by mixed peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) reactions, and then by PBMCs or synovial T cells with or without the addition of inflammatory cytokines (interleukin-17A (IL-17A), tumor necrosis factor-α (TNF-α), and interferon-γ (IFN-γ)) after stimulation with phytohemagglutinin (PHA), respectively. RESULTS: SMSCs from RA patients (RA-SMSCs) showed normal population doubling, cell viability, multiple differentiation characteristics, and surface markers. In either mixed PBMC reactions or PBMC proliferation stimulated with PHA, RA-SMSCs showed normal immunomodulation function compared with SMSCs from healthy donors (HD-SMSCs). However, the increase in proliferation of T cells was observed when IL-17A and TNF-α were added alone or in combination. CONCLUSIONS: Our data suggest that the inflammatory niche, especially these cytokines, may increase the proliferation of T cells cocultured with SMSCs in RA.
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