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結核の病因の最近の理解により、結核の治療に免疫療法が適用される可能性があります。宿主の抗マイコバクテリア免疫応答を上方制御し、T細胞抑制および/またはマクロファージ障害のサイトカインを減衰させる治療は、結核の治療に有用であることが証明される可能性があります。ESAT6、6-kDA初期分泌抗原標的は強力な保護抗原であり、長寿命の記憶細胞の主要な標的と見なされます。本研究では、ESAT-6の免疫療法の可能性は、実験的結核のマウスモデルで評価されています。本研究では、ESAT-6タンパク質は、PET23A（+）プラスミドを使用して大腸菌でクローン化され、Ni（2+）-NTAクロマトグラフィーによって精製されました。さらに、組換えESAT-6の免疫療法の可能性（標的器官のCFU列挙と肺の組織病理学的分析の観点から）は、実験的結核に対して評価されました。C末端ヒスチジンタグと遊離N末端を備えた組換えESAT-6は、ESAT-6の自然な形がクローン化され、精製されたことを模倣しています。ジメチルジオクタデシルアンモニウム臭化物（DDA）でアジュバントされた組換えESAT-6タンパク質は、感染したマウスの標的臓器の細菌負荷を適度に減少させました。さらに、製剤（ESAT-6-DDA）は、抗結核薬と組み合わせて投与すると相乗的に作用することができました。この組換えESAT-6は、実験的結核に対する良好な免疫療法の可能性を示し、従来の抗結核化学療法の補助として使用できます。
結核の病因の最近の理解により、結核の治療に免疫療法が適用される可能性があります。宿主の抗マイコバクテリア免疫応答を上方制御し、T細胞抑制および/またはマクロファージ障害のサイトカインを減衰させる治療は、結核の治療に有用であることが証明される可能性があります。ESAT6、6-kDA初期分泌抗原標的は強力な保護抗原であり、長寿命の記憶細胞の主要な標的と見なされます。本研究では、ESAT-6の免疫療法の可能性は、実験的結核のマウスモデルで評価されています。本研究では、ESAT-6タンパク質は、PET23A（+）プラスミドを使用して大腸菌でクローン化され、Ni（2+）-NTAクロマトグラフィーによって精製されました。さらに、組換えESAT-6の免疫療法の可能性（標的器官のCFU列挙と肺の組織病理学的分析の観点から）は、実験的結核に対して評価されました。C末端ヒスチジンタグと遊離N末端を備えた組換えESAT-6は、ESAT-6の自然な形がクローン化され、精製されたことを模倣しています。ジメチルジオクタデシルアンモニウム臭化物（DDA）でアジュバントされた組換えESAT-6タンパク質は、感染したマウスの標的臓器の細菌負荷を適度に減少させました。さらに、製剤（ESAT-6-DDA）は、抗結核薬と組み合わせて投与すると相乗的に作用することができました。この組換えESAT-6は、実験的結核に対する良好な免疫療法の可能性を示し、従来の抗結核化学療法の補助として使用できます。
Recent understanding of the pathogenesis of tuberculosis allows the possible application of immunotherapy for the treatment of tuberculosis. Therapies that would upregulate the host antimycobacterial immune response and/or attenuate T-cell suppressive and macrophage-deactivating cytokines may prove to be useful in the treatment of tuberculosis. ESAT6, 6-kDa early secreted antigenic target, is a potent protective antigen and is considered as major target for long-lived memory cells. In the present study the immunotherapeutic potential of ESAT-6 has been evaluated in mouse model of experimental tuberculosis. In the present study the ESAT-6 protein was cloned in Escherichia coli using pET23a(+) plasmid and purified by Ni(2+)-NTA chromatography. Further, the immunotherapeutic potential of the recombinant ESAT-6 (in terms of CFU enumeration in the target organs and histopathological analysis of lungs) was evaluated against experimental tuberculosis. The recombinant ESAT-6 with C-terminal histidine-tag and free N-terminus mimics the natural form of ESAT-6 has been successfully cloned and purified. The recombinant ESAT-6 protein adjuvanted with dimethyl dioctadecylammonium bromide (DDA) moderately reduced the bacterial load in the target organs of infected mice. Further, the formulation (ESAT-6-DDA) was able to act synergistically when given in combination with antituberculosis drugs. This recombinant ESAT-6 showed good immunotherapeutic potential against experimental tuberculosis and can be used as an adjunct to the conventional antituberculosis chemotherapy.
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