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目的：Gタンパク質シグナル伝達（RGS）2のRhoeおよびRegulatorは、圧縮下のヒト歯周靭帯（PDL）細胞の上方制御された遺伝子として特定されました。RhoeはRho GtPaseファミリーに属し、GTPase活性化タンパク質の新規ファミリーであるRGS2がGタンパク質シグナル伝達をオフにします。Rhoファミリータンパク質は最近、さまざまな細胞タイプのアクチン細胞骨格のダイナミクスを調節することが知られています。この研究では、機械的ストレス下でのPDL細胞におけるアクチンフィラメント組織の調節におけるRhoeとRGS2の関与を調査しました。 方法：ヒトPDL細胞を培養し、48時間の静的圧縮力（3.0g/cm（2））にかけました。アクチン細胞骨格の変化と、機械的ストレスに応答したRhoeおよびRGS2の発現を観察するために、免疫蛍光分析を実施しました。アクチンフィラメント組織におけるRhoeとRGS2の役割を調べるために、細胞にRhoeおよびRGS2にアンチセンスS-オリゴヌクレオチド（ODN）をトランスフェクトしました。 結果：圧縮力により、アクチンストレス繊維の損失と分解が生じました。免疫細胞化学的研究により、RhoeおよびRGS2の発現は機械的ストレスによって誘導され、それぞれ核周囲および細胞膜に局在することが明らかになりました。圧縮力によって引き起こされる応力繊維の形成障害は、コントロールレベルへの根気へのアンチセンスS-ODNによる治療により回収されました。ただし、RGS2にアンチセンスS-ODNを添加しても、ストレス繊維形成には影響しませんでした。 結論：これらの結果は、機械的ストレスによる応力繊維の喪失と分解が、RGS2の運動なしに、ローエシグナル伝達を媒介していることを示しています。
目的：Gタンパク質シグナル伝達（RGS）2のRhoeおよびRegulatorは、圧縮下のヒト歯周靭帯（PDL）細胞の上方制御された遺伝子として特定されました。RhoeはRho GtPaseファミリーに属し、GTPase活性化タンパク質の新規ファミリーであるRGS2がGタンパク質シグナル伝達をオフにします。Rhoファミリータンパク質は最近、さまざまな細胞タイプのアクチン細胞骨格のダイナミクスを調節することが知られています。この研究では、機械的ストレス下でのPDL細胞におけるアクチンフィラメント組織の調節におけるRhoeとRGS2の関与を調査しました。 方法：ヒトPDL細胞を培養し、48時間の静的圧縮力（3.0g/cm（2））にかけました。アクチン細胞骨格の変化と、機械的ストレスに応答したRhoeおよびRGS2の発現を観察するために、免疫蛍光分析を実施しました。アクチンフィラメント組織におけるRhoeとRGS2の役割を調べるために、細胞にRhoeおよびRGS2にアンチセンスS-オリゴヌクレオチド（ODN）をトランスフェクトしました。 結果：圧縮力により、アクチンストレス繊維の損失と分解が生じました。免疫細胞化学的研究により、RhoeおよびRGS2の発現は機械的ストレスによって誘導され、それぞれ核周囲および細胞膜に局在することが明らかになりました。圧縮力によって引き起こされる応力繊維の形成障害は、コントロールレベルへの根気へのアンチセンスS-ODNによる治療により回収されました。ただし、RGS2にアンチセンスS-ODNを添加しても、ストレス繊維形成には影響しませんでした。 結論：これらの結果は、機械的ストレスによる応力繊維の喪失と分解が、RGS2の運動なしに、ローエシグナル伝達を媒介していることを示しています。
OBJECTIVES: RhoE and regulator of G-proteins signalling (RGS) 2 were identified as the up-regulated genes in human periodontal ligament (PDL) cells under compression. RhoE belongs to the Rho GTPase family, and RGS2, a novel family of GTPase-activating proteins, turns off the G-protein signalling. Rho family proteins have recently been known to regulate actin cytoskeleton dynamics in various cell types. In this study, we investigated the involvement of RhoE and RGS2 in the regulation of actin filament organization in the PDL cells under mechanical stress. METHODS: Human PDL cells were cultured and subjected to a static compressive force (3.0g/cm(2)) for 48h. To observe changes in the actin cytoskeleton and the expression of RhoE and RGS2 in response to mechanical stress, immunofluorescence analysis was performed. To examine the role of RhoE and RGS2 in actin filament organization, cells were transfected with antisense S-oligonucleotides (ODNs) to RhoE and RGS2. RESULTS: Compressive force caused a loss and disassembly of actin stress fibres leading to cell spreading. Immunocytochemical study revealed that RhoE and RGS2 expressions were induced by mechanical stress and localized in the perinuclear and in the cell membrane, respectively. The impaired formation of stress fibres caused by compressive forces was recovered by treatment with antisense S-ODN to RhoE to the control levels. However, addition of antisense S-ODN to RGS2 did not affect the stress fibre formation. CONCLUSIONS: These results indicate that the loss and disassembly of stress fibres due to mechanical stress are mediating RhoE signalling, without the exertion of RGS2.
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