ヒト肝前駆細胞は造血細胞マーカーを発現しますCD45およびCD109

目的：肝疾患における将来の細胞療法のためのヒト肝前駆細胞（HPC）の正確な特性を明確にする。 方法：肝臓前駆細胞のような細胞を分離し、さまざまな病理のために部分的な肝切除を受けたが、肝機能障害の兆候を示さなかった患者の肝臓から培養されました。これらの細胞は、トランスクリプトームプロファイリング、定量的リアルタイムPCR、および免疫細胞/組織化学によって特徴付けられました。 結果：培養されたHPCには、多角形の高核/細胞質比が含まれており、一次肝細胞と同様のグローバルな遺伝子発現プロファイル（67.8％）を示しました。HPCで20倍以上高い発現を持つ遺伝子の中には、前駆細胞マーカー（CD90）、ペントラキシン関連遺伝子（PTX3）、コラーゲンタンパク質（COL5A2、COL1A1およびCOL4A2）、サイトカイン（EGFおよびPDGFD）、代謝酵素（CyBRD1、BCAT1、TIMP2およびPAM）、分泌タンパク質（SPARC）および内皮タンパク質C受容体（Procr）。さらに、以前にHPCマーカーと記載されている8つのマーカー（ALB、AFP、CK8、CK18、CK19、CD90、CD117、OVAL-6）は、QRT-PCRおよび/または免疫細胞/組織化学によって検証されました。興味深いことに、ヒトHPCは造血細胞マーカーCD45およびCD109に対しても陽性でした。最後に、以前に記載された6つのマーカー（OVAL-6、CK8、CK18、CK19、CD90およびCD117）と2つの潜在的なマーカー（CD45およびCD109）を備えた、ヘリングの運河および脳腸領域におけるHPCの局在化を特徴づけました。 結論：ヒトHPCは、転写プロファイルの一次肝細胞と非常に類似しています。CD45およびCD109マーカーは、肝疾患のさらなる細胞療法のためにHPCを特定して隔離するために潜在的に利用できます。

OBJECTIVE: To clarify the precise characteristics of human hepatic progenitor cells (HPCs) for future cytotherapy in liver diseases. METHODS: Hepatic progenitor-like cells were isolated and cultured from the livers of patients who had undergone partial hepatectomy for various pathologies but displayed no sign of hepatic dysfunction. These cells were characterized by transcriptomic profiling, quantitative real-time PCR and immunocyto/histochemistry. RESULTS: Cultured HPCs contained polygonal, high nucleus/cytoplasm ratio and exhibited a global gene expression profile similar (67.8%) to that of primary hepatocytes. Among the genes with more than 20-fold higher expression in HPCs were a progenitor marker (CD90), a pentraxin-related gene (PTX3), collagen proteins (COL5A2, COL1A1 and COL4A2), cytokines (EGF and PDGFD), metabolic enzymes (CYBRD1, BCAT1, TIMP2 and PAM), a secreted protein (SPARC) and an endothelial protein C receptor (PROCR). Moreover, eight markers (ALB, AFP, CK8, CK18, CK19, CD90, CD117 and Oval-6) previously described as HPC markers were validated by qRT-PCR and/or immunocyto/histochemistry. Interestingly, human HPCs were also positive for the hematopoietic cell markers CD45 and CD109. Finally, we characterized the localization of HPCs in the canals of Hering and periportal areas with six previously described markers (Oval-6, CK8, CK18, CK19, CD90 and CD117) and two potential markers (CD45 and CD109). CONCLUSION: The human HPCs are highly similar to primary hepatocytes in their transcriptional profiles. The CD45 and CD109 markers could potentially be utilized to identify and isolate HPCs for further cytotherapy of liver diseases.