ヒト脂肪由来間葉系間質細胞色素性上皮由来因子細胞療法は、前立腺癌細胞の遺伝的およびエピジェネティックプロファイルを修正する

バックグラウンドの目的：脂肪由来間葉系間質細胞（ASC）は、癌に対する細胞療法の送達のための有望なツールです。しかし、ASCは腫瘍細胞の生物学的挙動に深い影響を及ぼす可能性があります。我々の研究の目的は、ASCSの遺伝子発現およびエピジェネティックなメチル化プロファイルに対する前立腺癌細胞のエピジェネティックなメチル化プロファイルと、ASCと前立腺癌細胞間の相互作用の修正に対する治療遺伝子の発現の影響を調べることを目的としています。 方法：ASCは、レンチウイルス形質導入によって修飾され、いずれかの緑色蛍光タンパク質を対照または色素上皮由来因子（PEDF）を治療分子として発現させました。PC3前立腺癌細胞は、ASC培養媒体（CCM）の存在下で培養され、PC3またはDU145への影響を培養しました。RAS細胞は、リアルタイムの定量的ポリメラーゼ連鎖反応、エピテクトメチル前立腺がん濃度のリアルタイム定量的ポリメラーゼ連鎖反応アレイ、およびルシフェラーゼレポーターアッセイによって検査されました。 結果：レンチウイルスベクターを形質導入したASCは、いくつかの腫瘍阻害遺伝子の発現を媒介することができました。その一部は、共培養PC3前立腺癌細胞のエピジェネティックなメチル化変化と相関していました。PC3細胞をASC-PEDF CCMで培養すると、腫瘍阻害に向けた遺伝子発現のバランスの変化が観察されました。 結論：これらの結果は、ASC-PEDF CCMがパラクリンの方法で腫瘍細胞の再プログラミングを促進できることを示唆しています。PEDFパラクリン療法に反応した前立腺癌の成長における遺伝的およびエピジェネティックなイベントの理解の向上は、より安全なさらに強力な抗腫瘍効果を達成することを目標に、ASC-PEDFをより効果的に使用できるようになります。

BACKGROUND AIMS: Adipose-derived mesenchymal stromal cells (ASCs) are promising tools for delivery of cytotherapy against cancer. However, ASCs can exert profound effects on biological behavior of tumor cells. Our study aimed to examine the influence of ASCs on gene expression and epigenetic methylation profiles of prostate cancer cells as well as the impact of expressing a therapeutic gene on modifying the interaction between ASCs and prostate cancer cells. METHODS: ASCs were modified by lentiviral transduction to express either green fluorescent protein as a control or pigment epithelium-derived factor (PEDF) as a therapeutic molecule. PC3 prostate cancer cells were cultured in the presence of ASC culture-conditioned media (CCM), and effects on PC3 or DU145. Ras cells were examined by means of real-time quantitative polymerase chain reaction, EpiTect methyl prostate cancer-focused real-time quantitative polymerase chain reaction arrays, and luciferase reporter assays. RESULTS: ASCs transduced with lentiviral vectors were able to mediate expression of several tumor-inhibitory genes, some of which correlated with epigenetic methylation changes on cocultured PC3 prostate cancer cells. When PC3 cells were cultured with ASC-PEDF CCM, we observed a shift in the balance of gene expression toward tumor inhibition, which suggests that PEDF reduces the potential tumor-promoting activity of unmodified ASCs. CONCLUSIONS: These results suggest that ASC-PEDF CCM can promote reprogramming of tumor cells in a paracrine manner. An improved understanding of genetic and epigenetic events in prostate cancer growth in response to PEDF paracrine therapy would enable a more effective use of ASC-PEDF, with the goal of achieving safer yet more potent anti-tumor effects.