APサイトの形成、検出、修復

この論文は、DNAのAP（アプリニック/アピリミジン）部位の形成と修復に関する主な側面の概要レビューと、それらの定量的決定を可能にする化学特性の一部です。[14C]メトキシアミンとの反応に基づいたAP部位を測定するための新しい方法について説明します。物理（ガンマ線）または化学物質（メチルメタン型亜酸塩、四酸化オスミウム）剤のいずれかによってDNAで生成されたAP部位の測定に適用されています。この方法は、特定のDNAグリコシラーゼの作用下でのDNAからの異常な塩基の切除を定量化し、AP部位を含むDNAの化学的または酵素分解を防ぐためにも使用されています。この論文には、AP部位中間体を介した塩基切除修復の最初のステップに関与する2つの酵素であるニンジン細胞からのウラシルDNAグリコシラーゼおよびAPエンドデオキシリボヌクレアーゼの精製と特性評価に関するデータが含まれています。不安定なAPサイトの生物学的効果についても説明します。

The paper is an outline review of the main aspects concerning the formation and repair of AP (apurinic/apyrimidinic) sites in DNA as well as some of the chemical properties allowing their quantitative determination. A new method for the measurement of AP sites based on their reaction with [14C]methoxyamine is described. It has been applied to the measurement of AP sites produced in DNA either by physical (gamma-rays) or chemical (methyl methanesulphonate, osmium tetroxide) agents. The method has also been used to quantify the excision of abnormal bases from DNA under the action of specific DNA glycosylases and to prevent the chemical or enzymatic degradation of DNA containing AP sites. The paper contains data about the purification and characterization of uracil-DNA glycosylase and AP endodeoxyribonuclease from carrot cells, two enzymes involved in the first steps of base excision repair through AP site intermediates. The biological effects of unrepaired AP sites are also discussed.