BXPC-3細胞におけるヒトインターロイキン-18の細胞内分布とインターフェロン-γ分泌

目的：in vitroでインターロイキン-18（IL-18）の特性を調査するには、IL-18、Interferon-γ（IFN-γ）、およびInterleukin-18変異体とBXPC-3系統の秘密活動を調査します。 方法：ヒトIL-18フルレングス遺伝子（HIL-18-F）とHIL-18の推定成熟タンパク質遺伝子（HIL-18-M）を発現ベクターPEGFP-N1に挿入して、MU1、MU2、MU3、およびMU4、およびBXPC-3系統に変換しました。MU1、MU2、およびPEGFP-C1コントロールグループ（P <0.05）x 3-（4,5-ジメチアゾール2-Ill）-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（MTT）の間には、増殖アッセイのために2,5-diphenyltetrazolium bromide（MTT）、およびMU1とMU 2の蛍光が標的に標的にされた蛍光が標的にされました。レーザースキャン顕微鏡（OLSM）。HIL-18の細胞内分布を特徴付けるために、組換えIL-18をそれぞれ緑色蛍光タンパク質遺伝子に融合し、BXPC-3細胞で発現しました。 結果：結果は、MU1がBXPC-3細胞の膜領域に傾向があることを示しました。これは、N末端の元アミノ酸ペプチドがCHIL-18標的がBXPC-3細胞膜の標的を助けたことを示しています。ELISAの結果は、組換えプラスミドをトランスフェクトするBXPC-3細胞のIFN-γおよびIL-18分泌レベルを示したことを実証しました（P <0.01）。IL-2発現を指し、組換えプラスミドをトランスフェクトする2つのBXPC-3細胞グループには有意な機能はありません（P> 0.05）。 結論：結果は、HIL-18およびHIL-18の推定成熟したタンパク質がBXPC-3細胞にIFN-γの分泌を誘導し、IL-18の発現を増加させることができるが、IL-2には影響がないことを示した。

OBJECTIVE: To investigate the characteristics of interleukin-18 (IL-18) in vitro, explore IL-18, interferon-γ (IFN-γ) and interleukin-2 (IL-2) secretive activity in BxPC-3 line cells with interleukin-18 mutants. METHODS: Human IL-18 full-length gene (hIL-18-F) and the hIL-18 presumed mature protein gene (hIL-18-M) were inserted into the expression vector pEGFP-N1, to construct recombinant plasmids as Mu0, Mu1, Mu2, Mu3, and Mu4, and the recombinant plasmids were then transferred into BxPC-3 line cells. There are significant differences between Mu1, Mu2 and the pEGFP-C1 control group (P<0.05) by 3-(4,5-dimethiazol- 2-yl)- 2,5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) for a proliferation assay, and the fluorescence of the Mu1 and Mu 2 appeared targeted to the membranous region in the BxPC-3 cells after transfected 24h by confocal laser scanning microscope (OLSM).To characterize the intracellular distribution of hIL-18, recombinant IL-18 were each fused to the enhanced green fluorescent protein gene, and expressed in BxPC-3 cells. RESULTS: Results showed that the Mu1 tended to the membranous region in BxPC-3 cells, this indicates that the N-terminal former amino acid peptide helped ChIL-18 target to BxPC-3 cellS membranes. ELISA results demonstrated that IFN-γ and IL-18 secreted levels of BxPC-3 cells transfecting with recombinant plasmid showed an significant difference (P<0.01); refers to IL-2 expression, the two BxPC-3 cells groups transfecting with recombinant plasmid have no significant function (P>0.05). CONCLUSIONS: The results showed that hIL-18 and hIL-18 presumed mature protein can induce the secretion of IFN-γ in BxPC-3 cells, and increase the expression of IL-18, but they have no effects on IL-2.