呼吸器合胞体ウイルスNS1タンパク質は、SOCS1発現を誘導することによりSTAT2を分解します

目的：呼吸器合胞体ウイルス（RSV）非構造タンパク質NS1（NS1）は、インターフェロン（IFN）誘導性抗ウイルスシグナル伝達をブロックすることが示されています。サイトカインシグナル伝達（SOCS）遺伝子ファミリーのサプレッサーは、フィードバックループを利用してJAK/STATシグナル伝達経路の活性化をブロックし、ホストI型IFNの活性化をさらに阻害することができます。この抗ウイルスメカニズムにおけるSOCS1およびSOCS3遺伝子の役割を評価しました。 材料と方法：ヒト化された安定したNS1（GCが豊富）発現プラスミドを構築し、A549細胞にトランスフェクトしました。SOCS1、SOCS3、RIG-I、およびTLR3 mRNAの発現は、リアルタイムPCRで測定されました。STAT2およびPSTAT2の発現は、ウエスタンブロッティングで決定されました。 結果：RSV NS1は、SOCS1 mRNAの発現を上方制御し、非常に初期の段階でのベースラインレベルと比較して30倍の増加（P <0.01）、およびRIG-IまたはTLR3 mRNAの沈黙はNS1誘発SOCS1発現に影響しませんでした。NS1は、IFN-α誘発STAT2のリン酸化を阻害し、STAT2を分解し、空のベクトル制御と比較して時間依存的に分解しました（P <0.05）。 結論：RSV NS1は、STAT2リン酸化を阻害するために、RIG-I-I-I-I-I-I-I-I-I-I-INT依存性経路でSOCS1発現を上方制御します。

OBJECTIVES: Respiratory syncytial virus (RSV) nonstructural protein NS1 (NS1) has been shown to block interferon (IFN)-inducible antiviral signaling. The suppressor of cytokine signaling (SOCS) gene family could utilize a feedback loop to block the activation of the JAK/STAT signaling pathway, further inhibiting the activation of host type I IFN. We evaluated the role of the SOCS1 and SOCS3 genes in this antiviral mechanism. MATERIAL AND METHODS: A humanized stable NS1 (rich in GC)-expressing plasmid was constructed, and A549 cells were transfected with it. Expression of the SOCS1, SOCS3, RIG-I, and TLR3 mRNAs was measured with real-time PCR. STAT2 and pSTAT2 expression was determined with Western blotting. RESULTS: RSV NS1 upregulated SOCS1 mRNA expression 30-fold increase compared with the baseline level in very early phase (p < 0.01), and silence of RIG-I or TLR3 mRNA did not affect NS1-induced SOCS1 expression. NS1 inhibited IFN-α-induced STAT2 phosphorylation and degraded STAT2 in a time-dependent manner compared with the empty-vector control (p < 0.05). CONCLUSION: RSV NS1 upregulates SOCS1 expression in a RIG-I- and TLR3-independent pathway, to inhibit STAT2 phosphorylation.