ヒト胚性幹細胞の神経前駆細胞への指示された分化

さまざまなプロトコルが使用されており、ヒト胚性幹細胞から神経前駆細胞を生成しています。私たちは、神経ロゼットを生成する単層文化アプローチに焦点を合わせてきました。分化を開始するために、細胞はBMP阻害剤の存在下で血清を含まない栄養型培地に播種します。使用する細胞株に応じて、神経分化を促進するために追加の成長因子阻害剤が必要になる場合があります。長期培養とノッチ阻害剤DAPTの添加は、末端神経分化を促進する可能性があります。細胞型特異的マーカーの免疫細胞化学を使用して、分化の程度が監視されます。

A variety of protocols have been used to produce neural progenitors from human embryonic stem cells. We have focused on a monolayer culture approach that generates neural rosettes. To initiate differentiation, cells are plated in a serum-free nutrient-poor medium in the presence of a BMP inhibitor. Depending on the cell line used, additional growth factor inhibitors may be required to promote neural differentiation. Long-term culture and addition of the Notch inhibitor DAPT can promote terminal neuronal differentiation. Extent of differentiation is monitored using immunocytochemistry for cell type-specific markers.