バイオイド：タンパク質間相互作用のスクリーン

バイオイドは、生細胞で発生する生理学的に関連するタンパク質相互作用をスクリーニングするユニークな方法です。この技術は、近接性に基づいて、無差別なビオチンリガーゼをビオチン酸タンパク質に活用しています。リガーゼは目的のタンパク質に融合し、細胞で発現し、そこで近位内因性タンパク質をビオチン化します。それは本質的にまれなタンパク質修飾であるため、バイオイド融合タンパク質によるこれらの内因性タンパク質のビオチン化により、標準的なビオチン - 親和性捕捉との選択的分離と同定が可能になります。バイオイドによって同定されたタンパク質は、関心のあるタンパク質の候補者相互作用者です。バイオイドは不溶性タンパク質に適用し、弱いおよび/または一時的な相互作用を特定することができ、時間的調節に適しています。最初に哺乳類細胞に適用されていたバイオイドは、多様な種のさまざまな細胞タイプに潜在的な応用を持っています。

BioID is a unique method to screen for physiologically relevant protein interactions that occur in living cells. This technique harnesses a promiscuous biotin ligase to biotinylate proteins based on proximity. The ligase is fused to a protein of interest and expressed in cells, where it biotinylates proximal endogenous proteins. Because it is a rare protein modification in nature, biotinylation of these endogenous proteins by BioID fusion proteins enables their selective isolation and identification with standard biotin-affinity capture. Proteins identified by BioID are candidate interactors for the protein of interest. BioID can be applied to insoluble proteins, can identify weak and/or transient interactions, and is amenable to temporal regulation. Initially applied to mammalian cells, BioID has potential application in a variety of cell types from diverse species.