AAVベクターを介した遺伝子送達アプローチは、マウスの機能的ヒトCD8+ T細胞の再構成を促進します

本研究では、ヒト化マウスの機能的CD8（+）T細胞の再構成を改善するために、新規アデノ関連ウイルス（AAV）ベクター媒介遺伝子送達アプローチを採用し、それによりヒト免疫系（HIS）を模倣しました。HLA-A2と選択されたヒトサイトカイン（A2/Hucytokines）をコードするヒト遺伝子は、AAV血清型9（AAV9）ベクターを使用して、免疫不足マウスモデル[NOD/SCID/IL2Rγ（NSG）マウス]を導入しました。ヒト造血幹細胞の。AAV9をエンコードするAAV9で導入されたNSGマウスは、HLA-A2単独またはHLA-A2-トランスジェニックNSGマウスをコードするAAV9と比較して、ヒトCD45（+）細胞の再構成のレベルが高くなりました。さらに、彼のマウスのこのグループは、ヒトマラリアおよびHIV抗原を発現する組換えアデノウイルスを使用したワクチン接種時に、最高レベルの抗原特異的A2制限ヒトCD8（+）T細胞応答を搭載しました。最後に、ヒトマラリアワクチン化されたヒトCD8（+）T細胞応答は、彼のマウスがA2分子の文脈でヒトマラリア抗原を発現する肝細胞に対する細胞毒性活性を示すことにより機能的であることが示されました。まとめると、我々のデータは、AAVベクターを介した遺伝子送達が、複数のヒト遺伝子を免疫不全マウスに移すためのシンプルで効率的な方法であることを示しており、したがって、マウスのHISの再構成の成功を促進します。この研究で生成された彼のマウスは、最終的に、臨床前の環境でさまざまなヒトワクチン候補のT細胞免疫原性を迅速に評価できるはずです。

In the present study, a novel adeno-associated virus (AAV) vector-mediated gene delivery approach was taken to improve the reconstitution of functional CD8(+) T cells in humanized mice, thereby mimicking the human immune system (HIS). Human genes encoding HLA-A2 and selected human cytokines (A2/hucytokines) were introduced to an immune-deficient mouse model [NOD/SCID/IL2rγ(null) (NSG) mice] using AAV serotype 9 (AAV9) vectors, followed by transplantation of human hematopoietic stem cells. NSG mice transduced with AAV9 encoding A2/hucytokines resulted in higher levels of reconstitution of human CD45(+) cells compared to NSG mice transduced with AAV9 encoding HLA-A2 alone or HLA-A2-transgenic NSG mice. Furthermore, this group of HIS mice also mounted the highest level of antigen-specific A2-restricted human CD8(+) T-cell response upon vaccination with recombinant adenoviruses expressing human malaria and HIV antigens. Finally, the human CD8(+) T-cell response induced in human malaria vaccine-immunized HIS mice was shown to be functional by displaying cytotoxic activity against hepatocytes that express the human malaria antigen in the context of A2 molecules. Taken together, our data show that AAV vector-mediated gene delivery is a simple and efficient method to transfer multiple human genes to immune-deficient mice, thus facilitating successful reconstitution of HIS in mice. The HIS mice generated in this study should ultimately allow us to swiftly evaluate the T-cell immunogenicity of various human vaccine candidates in a pre-clinical setting.