特定の遺伝子センシングプラットフォームを開発するための単純なジアゾニウム化学

安定したジアゾン化された伝導プラットフォームの形成に基づいた共有結合固定化DNA配列の簡単な戦略について説明します。水性媒体のスクリーン印刷炭素電極（SPCE）への4-ニトロベンゼンジンジアゾニウム塩の電気化学的還元は、末端グラフトされたアミノ基を生じさせます。一次芳香族アミンの存在により、DNA捕捉プローブに存在するアミンと反応することができるジアゾニウムカチオンの形成が可能になります。比較として、架橋剤を介した開発されたジアゾン化された導電性プラットフォームへのアミネートDNAキャプチャプローブの結合に基づく2番目の戦略も採用されました。得られたDNAセンシングプラットフォームは、環状ボルタンメトリー、電気化学的インピーダンス分光法、および分光式エリプスメトリーによって特徴付けられました。相補的な配列を備えたハイブリダイゼーションイベントは、電気化学指標として塩化塩化ヘキサアミネルテニウム（III）を使用して検出されました。最後に、それらはヒト遺伝子MRP3からの145 bpシーケンスの分析に適用され、210pgμL（-1）の検出限界に達しました。

A simple strategy for covalent immobilizing DNA sequences, based on the formation of stable diazonized conducting platforms, is described. The electrochemical reduction of 4-nitrobenzenediazonium salt onto screen-printed carbon electrodes (SPCE) in aqueous media gives rise to terminal grafted amino groups. The presence of primary aromatic amines allows the formation of diazonium cations capable to react with the amines present at the DNA capture probe. As a comparison a second strategy based on the binding of aminated DNA capture probes to the developed diazonized conducting platforms through a crosslinking agent was also employed. The resulting DNA sensing platforms were characterized by cyclic voltammetry, electrochemical impedance spectroscopy and spectroscopic ellipsometry. The hybridization event with the complementary sequence was detected using hexaamineruthenium (III) chloride as electrochemical indicator. Finally, they were applied to the analysis of a 145-bp sequence from the human gene MRP3, reaching a detection limit of 210 pg μL(-1).