バチルス亜種Xylオペロンの発現は、転写のレベルで抑制され、キシロースによって誘導されます

キシロースイソメラーゼの発現は、亜ティリス株W23、168、およびBr151で抑制され、キシロースの存在下で誘導される可能性があります。この効果はW23では観察されなかったが、この発現は株168およびBR151株で抑制されたグルコースも抑制された。XIL-CAT融合遺伝子は、W23に由来する366塩基対（BP）DNAフラグメントに位置するXylプロモーターがクロラムフェニコール耐性の発現を指示する366塩基対（BP）DNAフラグメントに配置されたマルチコピープラスミド上に構築されました。表現の規制は、このマルチコピーの状況ではそれほど顕著ではありませんでした。Xylプロモーターは、転写開始の強力なシグナルです。Xyl mRNAの5 '配列は、Nuclease S1マッピングによって識別されました。プロモーターは、-10シーケンスTAAGAT、17 bpで間隔を空けた-35シーケンスTTGAAA、および17 bpのうち14の上流のポリ（a）ブロックで構成されていました。調節を研究するために、Xyl-Lacz融合遺伝子を構築し、B。subtilis168の扁桃体への単一コピーとして統合しました。-d-ガラクトシド）グルコースの存在下でキシロースと白の存在下での指標プレート。定量的に、キシロースによるベータガラクトシダーゼの誘導は100倍でした。キシロースとグルコースの存在下では、指標遺伝子の発現が完全に誘導されたレベルの30％に抑制されました。マルチコピープラスミド上のトランスで366 bpのXyl DNAフラグメントが提供された場合、このひずみで最大LACZ発現の約25〜60％が得られました。この結果は、キシロースの非存在下での抑制が、B。subtilis168で低レベルで発現する可溶性因子によってトランスで媒介されることを示しています。キシロース効果は負の調節に依存していました。ドットブロット分析によるmRNA量の推定は、キシロースによる誘導が転写のレベルで発生することを明確に示しています。考えられる分子メカニズムは、366-bpキシル調節DNAのヌクレオチド配列に関して議論されています。

Expression of xylose isomerase was repressed in Bacillus subtilis strains W23, 168, and BR151 and could be induced in the presence of xylose. The expression was also glucose repressed in strains 168 and BR151, although this effect was not observed with W23. A xyl-cat fusion gene was constructed on a multicopy plasmid, from which the xyl promoter located on a 366-base-pair (bp) DNA fragment derived from W23 directed the expression of chloramphenicol resistance. The regulation of expression was not very pronounced in this multicopy situation. The xyl promoter is a strong signal for transcription initiation. The 5' sequence of the xyl mRNA was identified by nuclease S1 mapping. The promoter consisted of the -10 sequence TAAGAT, the -35 sequence TTGAAA spaced by 17 bp, and an upstream poly(A) block with 14 As out of 17 bp. To study the regulation, a xyl-lacZ fusion gene was constructed and integrated as a single copy into the amygene of B. subtilis 168. This strain grows blue on X-Gal (5-bromo-4-chloro-3-indolyl-beta-D-galactoside) indicator plates in the presence of xylose and white in the presence of glucose. Quantitatively, the induction of beta-galactosidase by xylose was 100-fold. In the presence of xylose plus glucose, the expression of the indicator gene was repressed to 30% of the fully induced level. About 25 to 60% of the maximal lacZ expression was obtained with this strain when the 366-bp xyl DNA fragment was provided in trans on a multicopy plasmid. This result indicates that repression in the absence of xylose is mediated in trans by a soluble factor which is expressed at a low level in B. subtilis 168. The xylose effect depended on negative regulation. The estimations of mRNA amounts by dot blot analysis showed unambiguously that the induction by xylose occurs at the level of transcription. The possible molecular mechanisms are discussed with respect to the nucleotide sequence of the 366-bp xyl regulatory DNA.