格差由来の血小板濃縮物の貯蔵中の一酸化窒素媒介阻害阻害血小板シグナル伝達の増加

背景：血小板（PLTS）の貯蔵は、PLT貯蔵病変と呼ばれるプロセスであるPLTの完全性と機能に影響します。通常のPLT関数は、基本的に、活性化および抑制性シグナル伝達経路のバランスの取れた相互作用に依存します。PLT濃縮物の貯蔵中の抑制性シグナル伝達の変化に関するデータが不十分なため、この研究では、一酸化酸化物ドナージエチルアミンジアゼニウムジオレート（DEA/NO）を使用することにより、周期的なヌクレオチド媒介阻害阻害経路の調節能力を調査しています。 研究デザインと方法：PLTは、全血（WB）および0、2、および5日間保存された格差由来PLT濃縮物（APC）から入手しました。血管拡張薬刺激リンタンパク質（VASP）リン酸化、環状ヌクレオチド濃度、フィブリノーゲン結合、およびアゴニスト誘導凝集は、DEA/NOによる刺激の有無にかかわらず測定されました。 結果：DEA/NO誘発VASPリン酸化は、WBと比較してAPCSからのPLTSで有意に高かった。これは、蓄積されたPLTSの環状アデノシンモノリン酸（CAMP）の周期的なグアノシンモノリン酸（CGMP）のより強い増加を条件としている。。5 nmol/L DEA/NOの量は、トロンビン受容体活性化ペプチド6およびコラーゲン誘導凝集または新たに収集されたPLTでのフィブリノーゲン結合に影響を与えませんでしたが、保存されたPLTSの両方で有意に阻害されました。 結論：保存されたPLTは、細胞内CGMP調節の障害を示し、その結果、貯蔵の過程でアゴニスト誘導凝集とフィブリノーゲン結合の阻害を超えました。観察された効果は、PLTの活性化ポテンシャルを減少させ、貯蔵病変に寄与する重要なメカニズムである可能性があります。

BACKGROUND: Storage of platelets (PLTs) affects PLT integrity and functionality, a process named the PLT storage lesion. Normal PLT function essentially depends on the balanced interaction of activating and inhibitory signaling pathways. As there are poor data on the alterations of inhibitory signaling during storage of PLT concentrates, this study investigates the modulation capability of the cyclic nucleotide-mediated inhibitory pathways by use of the nitric oxide donor diethylamine diazenium diolate (DEA/NO). STUDY DESIGN AND METHODS: PLTs were obtained from whole blood (WB) and from apheresis-derived PLT concentrates (APCs) stored for 0, 2, and 5 days. Vasodilator-stimulated phosphoprotein (VASP) phosphorylation, cyclic nucleotide concentrations, fibrinogen binding, and agonist-induced aggregation were measured without or after stimulation with DEA/NO. RESULTS: DEA/NO-induced VASP phosphorylation was significantly higher in PLTs from APCs on Days 2 and 5 compared to WB, conditioned by a stronger increase of cyclic guanosine monophosphate (cGMP), but not cyclic adenosine monophosphate (cAMP), in stored PLTs. A quantity of 5 nmol/L DEA/NO neither influenced thrombin receptor activator peptide 6 and collagen-induced aggregation nor fibrinogen binding in freshly collected PLTs, whereas it significantly inhibited both in stored PLTs. CONCLUSION: Stored PLTs showed an impairment of intracellular cGMP regulation, resulting in exceeding inhibition of agonist-induced aggregation and fibrinogen binding in the course of storage. The observed effects could be an important mechanism contributing to the storage lesion with reduced activating potential of PLTs.