[クロストリジウムディフィシルの臨床検査診断の経験]

背景：クロストリジウムディフィシルは現在、院内下痢の重要な原因です。数年間、コミュニティの感染性症例の数も増加しています。2010年の初め以来、Clostridium difficile感染症（CDIS）の数の大幅な増加が、Pardubice Regional Hospital（PRH）で注目されています。この研究の目的は、PRHのCDISの実験室診断で使用される方法を説明および評価し、ここで使用される実験室診断アルゴリズムを説明することでした。 材料と方法：スツールのサンプルは、2010年7月1日から2012年12月31日まで、PRHの外来部門で入院した症候性患者から採取されました。原理酵素免疫測定法C. diff quik cheek complete、techlabo（d-eia）が使用されました。システムGenexpert PCR Cepheid（PCR）は、実験室の調査結果の確認に使用されました。2011年の初めから、すべてのGDH陽性サンプルが培養されました。 結果：合計2,040個のサンプルを調べました。D-EIAテストは、2,014個のサンプルの検査に使用されました。そのうち、1,373（68.2％）のサンプルはGDHおよび毒素A/B陰性でした。359（17.8％）のサンプルでは、​​GDHと毒素A/Bの両方が検出されました。便サンプルの毒素性株を検出するためのD-EIAの感度と特異性は、それぞれ21.8％と97.2％でした。5％、10％、20％、50％の有病率のある集団について計算されたPPVおよびNPV率は、それぞれ0.29、0.46、0.66、0.88および0.96、0.92、0.83、0.55でした。便中のクロストリジウムディフィシルの検出に対するGDHの感度と特異性は、それぞれ100.0％と96.2％でした。PCR検査は、140のサンプルで実施されました。そのうち、82のサンプルはPCR陽性でした。毒素Bの産生の遺伝子は47％で検出されました。これは、リボタイプ027（毒素Bの遺伝子、バイナリ毒素、TCDCのバイナリ毒素、欠失）が48％であると疑われました。サンプルの5％で、毒素Bの遺伝子とバイナリ毒素の遺伝子が検出されました。 結論：クロストリジウムディフィシルの毒素性株を検出するためのD-EIAテストの低感度を考慮して、唯一のものとして使用すると、2段階のアルゴリズムが導入され、臨床微生物学部におけるクロストリジウムディフィシルの感染症の日常的な実験室検査が導入されました。PRH。最初のステップでは、D -EIAテストでは、検査サンプルの86％が30分で陽性（GDH +;毒素A/B +）または陰性（GDH - ;毒素A/B-）と診断されました。2番目のステップでPCRを使用した検査により、CDIと診断された患者の数が増加しました。テスト結果は2時間以内に利用できます。これにより、PRHの部門に隔離測定を迅速に導入し、患者の適切な抗生物質治療が可能になります。

BACKGROUND: Clostridium difficile is currently a significant cause of nosocomial diarrhea. For several years, the number of infectious cases in the community has also been increasing. Since the beginning of 2010, quite a large increase in the number of Clostridium difficile infections (CDIs) has been noted in Pardubice Regional Hospital (PRH). The objectives of this study were to describe and evaluate the methods used in the laboratory diagnosis of CDIs in PRH, and to describe the laboratory diagnostic algorithm used here. MATERIAL AND METHODS: Samples of stools were taken from symptomatic patients hospitalized or examined in the outpatient departments of PRH from 1 July 2010 to 31 December 2012. For the detection of glutamate dehydrogenase (GDH) and toxin A/B, the dual test based upon the principle enzyme immunoassays C. Diff Quik Chek Complete, Techlabo (D-EIA) was used. The system GeneXpert PCR Cepheid (PCR) was used for confirmation of laboratory findings. Since the beginning of 2011, all the GDH-positive samples were cultured. RESULTS: A total of 2,040 samples were examined. The D-EIA test was used for examination of 2,014 samples. Of those, 1,373 (68.2 %) samples were GDH- and toxin A/B-negative. In 359 (17.8 %) samples, both GDH and toxin A/B were detected. The D-EIA sensitivity and specificity for detecting toxigenic strains in stool samples were 21.8% and 97.2%, respectively. The PPV and NPV rates calculated for the populations with prevalence rates of disorders of 5%, 10%, 20% and 50 % were 0.29, 0.46, 0.66, 0.88 and 0.96, 0.92, 0.83, 0.55, respectively. The sensitivity and specificity of GDH for the detection of Clostridium difficile in stools were 100.0% and 96.2%, respectively. PCR examination was carried out in 140 samples. Of those, 82 samples were PCR-positive. The gene for the production of toxin B was detected in 47%, the finding suspected for ribotype 027 (gene for toxin B, binary toxin and deletion of tcdC) in 48%. In 5% of the samples, the gene for toxin B and the gene for the binary toxin were detected. CONCLUSION: Considering the low sensitivity of the D-EIA test for detecting the toxigenic strain of Clostridium difficile, if used as the only one, a two-step algorithm was introduced for routine laboratory examination of infections with Clostridium difficile in the Clinical Microbiology Department of PRH. In the first step, the D-EIA test diagnosed 86 % of examined samples in 30 minutes as positive (GDH +; toxin A/B +) or negative (GDH -; toxin A/B -). The examination with PCR in the second step increased the number of patients diagnosed with CDI. The test results are available within two hours. This enables quick introduction of isolation measures in the departments of PRH and appropriate antibiotic treatment of the patients.