p38/AKT-C-FOS-NFATC1シグナル伝達とPLCγに依存しないCa2+発振の阻害によるPraeruptorin aの抗星骨形成活性

背景：骨量の減少は、骨折の主要な危険因子です。いくつかの天然産物は、伝統的に骨粗鬆症を含む骨障害を予防および/または治療するための漢方薬として使用されてきました。Preruptorin Aは、Peucecuedanum preruptorum dunnの乾燥根抽出物から分離されており、いくつかの生物学的活性がありますが、その抗症候性活性はまだ研究されていません。 材料と方法：骨髄由来のマクロファージの破骨細胞への分化に対するPraeruptorin Aの効果を表現型アッセイによって調べ、リアルタイムPCRおよび免疫ブロットにより確認しました。Praeruptorin Aの抗骨閉鎖作用におけるNFATC1の関与は、そのレンチウイルスの異所性発現によって評価されました。細胞内Ca（2+）レベルも測定されました。 結果：Praeruporin Aは、P38およびAKTシグナル伝達の阻害を伴うRANKL刺激の破骨細胞分化を阻害しました。これは、C-FOSおよびNFATC1の抑制性発現レベルの理由である可能性があります。Praeruptorin Aの抗球形形成効果は、NFATC1の過剰発現によって救助されました。Prcγのリン酸化に変化することなく、Praeruptorin A AはRANKL誘導Ca（2+）振動を強く防止しました。 結論：Praeruptorin Aは、p38/Akt-C-FOS-NFATC1シグナル伝達とPLCγに依存しないCa（2+）振動を阻害することにより、抗星帯形成活性を示す可能性があります。

BACKGROUND: A decrease of bone mass is a major risk factor for fracture. Several natural products have traditionally been used as herbal medicines to prevent and/or treat bone disorders including osteoporosis. Praeruptorin A is isolated from the dry root extract of Peucedanum praeruptorum Dunn and has several biological activities, but its anti-osteoporotic activity has not been studied yet. MATERIALS AND METHODS: The effect of praeruptorin A on the differentiation of bone marrow-derived macrophages into osteoclasts was examined by phenotype assay and confirmed by real-time PCR and immunoblotting. The involvement of NFATc1 in the anti-osteoclastogenic action of praeruptorin A was evaluated by its lentiviral ectopic expression. Intracellular Ca(2+) levels were also measured. RESULTS: Praeruptorin A inhibited the RANKL-stimulated osteoclast differentiation accompanied by inhibition of p38 and Akt signaling, which could be the reason for praeruptorin A-downregulated expression levels of c-Fos and NFATc1, transcription factors that regulate osteoclast-specific genes, as well as osteoclast fusion-related molecules. The anti-osteoclastogenic effect of praeruptorin A was rescued by overexpression of NFATc1. Praeruptorin A strongly prevented the RANKL-induced Ca(2+) oscillation without any changes in the phosphorylation of PLCγ. CONCLUSION: Praeruptorin A could exhibit its anti-osteoclastogenic activity by inhibiting p38/Akt-c-Fos-NFATc1 signaling and PLCγ-independent Ca(2+) oscillation.