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目的:尿膜性エセリチアの病因における外膜タンパク質T(OMPT)の役割を研究する。 方法:培養ヒト膀胱上皮細胞株5637では、野生型(CFT073)、OMPT遺伝子ノックアウト(COTD)、および細胞へのE.COLIの回復(PST)株の接着能力を調べ、細胞外マトリックス(ECM)を調べました。接着遺伝子IHAおよび病原性遺伝子鉄の発現は、リアルタイムPCRによって検出されました。膀胱と腎臓組織の細菌負荷と血液中の細菌数を評価するために、3株を伴う尿路感染のマウスモデルが確立されました。また、マウスの膀胱および腎臓組織で、インターロイキン-6(IL-6)とIL-8の発現を検出しました。 結果:COTD株は、CFT073株よりも有意に低い細胞接着速度を示しました[(4.62∓0.39)%vs(8.81∓1.13)%、p <0.05]。CFT073株におけるIHAおよび鉄のmRNA発現は、COTD株の2.1および3.8倍でした。マウスモデルでは、膀胱組織におけるCFT073株の平均細菌負荷は6.36∓0.06であり、COTD(6.01∓0.07)のそれよりも有意に大きく、還流(6.29∓0.06)株(P <0.05);腎臓組織におけるCFT073株の細菌負荷も、COTD株の株よりも有意に高かった(6.25∓0.05対5.87∓0.06、p <0.05)。野生型、ノックアウト、および復帰株に感染したマウスでは、炎症性膀胱および腎臓組織のIL-8の検出率と同一のIL-6の検出率は、それぞれ60%、12.5%、および50%でした。 結論:OMPTは、接着遺伝子IHAおよびトランスフリン遺伝子鉄の発現を調節して、ヌロパソジェン性E.COLIの宿主細胞への接着に影響を与える可能性があります。
目的:尿膜性エセリチアの病因における外膜タンパク質T(OMPT)の役割を研究する。 方法:培養ヒト膀胱上皮細胞株5637では、野生型(CFT073)、OMPT遺伝子ノックアウト(COTD)、および細胞へのE.COLIの回復(PST)株の接着能力を調べ、細胞外マトリックス(ECM)を調べました。接着遺伝子IHAおよび病原性遺伝子鉄の発現は、リアルタイムPCRによって検出されました。膀胱と腎臓組織の細菌負荷と血液中の細菌数を評価するために、3株を伴う尿路感染のマウスモデルが確立されました。また、マウスの膀胱および腎臓組織で、インターロイキン-6(IL-6)とIL-8の発現を検出しました。 結果:COTD株は、CFT073株よりも有意に低い細胞接着速度を示しました[(4.62∓0.39)%vs(8.81∓1.13)%、p <0.05]。CFT073株におけるIHAおよび鉄のmRNA発現は、COTD株の2.1および3.8倍でした。マウスモデルでは、膀胱組織におけるCFT073株の平均細菌負荷は6.36∓0.06であり、COTD(6.01∓0.07)のそれよりも有意に大きく、還流(6.29∓0.06)株(P <0.05);腎臓組織におけるCFT073株の細菌負荷も、COTD株の株よりも有意に高かった(6.25∓0.05対5.87∓0.06、p <0.05)。野生型、ノックアウト、および復帰株に感染したマウスでは、炎症性膀胱および腎臓組織のIL-8の検出率と同一のIL-6の検出率は、それぞれ60%、12.5%、および50%でした。 結論:OMPTは、接着遺伝子IHAおよびトランスフリン遺伝子鉄の発現を調節して、ヌロパソジェン性E.COLIの宿主細胞への接着に影響を与える可能性があります。
OBJECTIVE: To study the role of outer membrane protein T (OmpT) in the pathogenesis of uropathogenic Escherichia.coli. METHODS: In cultured human bladder epithelial cell line 5637, we examined the adhesion ability of wild-type (CFT073), ompT gene knockout (COTD), and revertant (pST) strains of E.coli to the cells and the extracellular matrix (ECM). The expressions of the adhesion gene iha and virulence gene iroN were detected by real-time PCR. Murine models of urinary tract infection with the 3 strains were established to evaluate the bacterial burden of the bladder and kidney tissue and bacterial counts in blood. We also detected the expressions of interleukin-6 (IL-6) and IL-8 in the bladder and kidney tissues of the mice. RESULT: The COTD strain showed a significantly lower cell adhesion rate than CFT073 strain [(4.62∓0.39)% vs (8.81∓1.13)%, P<0.05] with also a lower ECM-adhesion rate [(4.95∓0.59)% vs (8.85∓0.79)%, P<0.05]. The mRNA expressions of iha and iroN in CFT073 strain were 2.1 and 3.8 times that of COTD strain. In the mouse model, the mean bacterial load of CFT073 strain in the bladder tissue was 6.36∓0.06, significantly greater than that of COTD (6.01∓0.07) and revertant (6.29∓0.06) strains (P<0.05); the bacterial load of CFT073 strain in the kidney tissue was also significantly higher than that of COTD strain (6.25∓0.05 vs 5.87∓0.06, P<0.05). In mice infected with the wild-type, knockout, and revertant strains, the detection rates of IL-6, which were identical to those of IL-8, in the inflammatory bladder and kidney tissues were 60%, 12.5%, and 50%, respectively. CONCLUSIONS: OmpT may regulate the expression of the adhesion gene iha and the transferrin gene iroN to affect the adhesion of uropathogenic E.coli to host cells.
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