HEK293細胞で発現する狂犬病ウイルス様粒子

狂犬病は感染性ウイルス性疾患であり、死亡率は100％に近い。現在、主に発展途上国では、狂犬病の効果的な予防のために、より安価でより免疫原性ワクチンを生成する必要があります。ウイルス様粒子は、生産プロセス中の免疫原性と安全性が高いため、ウイルスワクチンの生産に広く使用されています。狂犬病ウイルス糖タンパク質は、保護免疫応答を引き起こす主要な抗原であり、ウイルス中和抗体を生成できる唯一のタンパク質です。この研究では、HEK293細胞のレンチウイルスベースの形質導入により狂犬病ウイルス糖タンパク質を発現する狂犬病ウイルス様粒子（RV-VLPS）の産生のための組換え安定細胞株の発達について説明します。タンパク質発現は、フローサイトメトリー、蛍光顕微鏡、ウエスタンブロット、ELISAによって分析されました。粒子は培養上清から精製され、そのサイズと形態が研究されました。さらに、マウスにRV-VLPSで免疫化され、アジュバントで処方され、これらの粒子は特定の抗体応答を生成することができ、これらのウイルス様粒子が有望な狂犬病ワクチン候補を呈することを示しています。

Rabies is an infectious viral disease with a mortality rate close to 100%. Currently, there is a need to generate cheaper and more immunogenic vaccines for the effective prevention of rabies, mostly in developing countries. Virus-like particles have been widely used in viral vaccine production due to their high immunogenicity and safety during the production process. Rabies virus glycoprotein is the major antigen to trigger a protective immune response and the only protein capable of generating virus neutralizing antibodies. In this study we describe the development of a recombinant stable cell line for the production of rabies virus-like particles (RV-VLPs) expressing the rabies virus glycoprotein by lentivirus-based transduction of HEK293 cells. Protein expression was analyzed by flow cytometry, fluorescence microscopy, western blot and ELISA. Particles were purified from culture supernatant and their size and morphology were studied. Furthermore, mice were immunized with RV-VLPs, formulated with adjuvant, and these particles were able to produce a specific antibody response, demonstrating that these virus-like particles present a promising rabies vaccine candidate.