ヒトprepのAAVを介した発現は、マウスにおける膜攻撃複合体の補体活性化、脈絡膜血管新生、および堆積を阻害します

年齢に関連した黄斑変性（AMD）は、高齢者の盲目の主な原因です。AMD患者の約50％は、因子Hとして知られる補体の陰性調節因子に多型を患っています。因子HのY402H多型のホモ接合体の個体は、脈絡膜および網膜色素上皮の膜攻撃複合体（MAC）のレベルが高くなっています。野生型対立遺伝子用。C9の多型のためにMACを形成できないことは、AMD患者の脈絡膜血管新生（CNV）の形成から保護されています。したがって、AMD患者のMACをブロックすることは、CNVに対して保護される可能性があります。ここでは、AAV2/8ベクターを使用して網膜下路を介して供給された場合、補体媒介損傷の阻害剤として、ヒトのプロリン/アルギニンが豊富なロイシンリッチリピートタンパク質（Prep）の可能性を調査します。蛍光活性化細胞ソーティング（FACS）溶解アッセイでは、PrelPはHEPA-1C1C7細胞の正常なヒト血清媒介溶解溶解を18.7％阻害しました。予想外に、Prelpはヒト臍静脈内皮細胞（Huvecs）によるチューブの形成を約240％増強しましたが、AAVベクターを介してマウスの網膜に供給すると、Prelpはレーザー誘導CNVを60％阻害しました。in vivoでのMACの堆積を25.5％削減しました。我々の結果は、AMDの治療としての補体阻害剤の開発に影響を与えます。

Age-related macular degeneration (AMD) is the leading cause of blindness among the elderly. Approximately 50% of AMD patients have a polymorphism in the negative regulator of complement known as Factor H. Individuals homozygous for a Y402H polymorphism in Factor H have elevated levels of membrane attack complex (MAC) in their choroid and retinal pigment epithelium relative to individuals homozygous for the wild-type allele. An inability to form MAC due to a polymorphism in C9 is protective against the formation of choroidal neovascularization (CNV) in AMD patients. Hence, blocking MAC in AMD patients may be protective against CNV. Here we investigate the potential of human proline/arginine-rich end leucine-rich repeat protein (PRELP) as an inhibitor of complement-mediated damage when delivered via the subretinal route using an AAV2/8 vector. In a fluorescence-activated cell sorting (FACS) lysis assay, PRELP inhibited normal human serum-mediated lysis of Hepa-1c1c7 cells by 18.7%. Unexpectedly, PRELP enhanced the formation of tubes by human umbilical vein endothelial cells (HUVECs) by approximately 240%, but, when delivered via an AAV vector to the retina of mice, PRELP inhibited laser-induced CNV by 60%. PRELP reduced deposition of MAC in vivo by 25.5%. Our results have implications for the development of complement inhibitors as a therapy for AMD.