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Cold Spring Harbor protocols2014Apr01Vol.2014issue(4)

分離された新生児マウス背側根神経節(DRG)ニューロンからのCa2+電流の全細胞パッチクランプ記録

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

背側根神経節(DRG)の感覚ニューロンの一次培養は、CA(2+)チャネルを研究するために広く使用されているモデルです。DRGニューロンは、新生児または成体マウスから収集できます。培養の生産には数時間かかることがあり、そのように導出された細胞はほぼすぐに使用するか、1週間も維持できます。この方法により、全細胞パッチクランプ録音を含む多くの実験目的でニューロンを分離することができます。このプロトコルの目的は、DRG新生児ニューロンの収穫と成長と、これらの細胞の電圧感受性Ca(2+)チャネルを介して全細胞電流を記録するために一般的に使用される方法の説明を提供することです。

背側根神経節(DRG)の感覚ニューロンの一次培養は、CA(2+)チャネルを研究するために広く使用されているモデルです。DRGニューロンは、新生児または成体マウスから収集できます。培養の生産には数時間かかることがあり、そのように導出された細胞はほぼすぐに使用するか、1週間も維持できます。この方法により、全細胞パッチクランプ録音を含む多くの実験目的でニューロンを分離することができます。このプロトコルの目的は、DRG新生児ニューロンの収穫と成長と、これらの細胞の電圧感受性Ca(2+)チャネルを介して全細胞電流を記録するために一般的に使用される方法の説明を提供することです。

Primary culture of sensory neurons from dorsal root ganglia (DRGs) is a widely used model for studying Ca(2+) channels. DRG neurons can be collected from neonate or adult mice; the production of cultures can take a couple of hours, and cells so derived can be used almost immediately or maintained for as long as 1 wk. This method allows the isolation of neurons for numerous experimental purposes, including whole-cell patch-clamp recording. The purpose of this protocol is to provide a description of methods commonly used for the harvest and growth of DRG neonatal neurons as well as for recording whole-cell currents through voltage-sensitive Ca(2+) channels in these cells.

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