HIV-1逆転写酵素の複数の変異は、ジドブジン（AZT）に対する高レベルの耐性を付与します

免疫不全症候群（AIDS）またはAIDS関連の複合体を持つ個人からのジドブジン（3'-azido-3'-デオキシミジン、AZT）に対する感度が低下したヒト免疫不全ウイルス（HIV）分離株を研究して、抵抗の遺伝的基盤を決定しました。ほとんどは、治療中および治療中に得られた連続分離株でした。5組の感受性および耐性分離株からの逆転写酵素（RT）コード領域の比較ヌクレオチド配列分析により、すべての耐性株に共通する3つの予測アミノ酸置換が特定されました（ASP67 ---- ASN、Lys70 ---- ARG、THR215----- pheまたはtyr）に3つの分離株の4番目（Lys219 ---- Gln）。部分的に耐性の分離株には、これらの4つの変化の組み合わせがありました。RTのこれら4つの変異で構築された感染性分子クローンは、T細胞のトランスフェクション後に非常に耐性のあるHIVを生成しました。これらの変異の再現可能な性質は、末梢血リンパ球からの核酸のポリメラーゼ連鎖反応増幅を実施することにより、ジドブジン耐性を予測するための迅速なアッセイを開発することを可能にするはずです。

Human immunodeficiency virus (HIV) isolates with reduced sensitivity to zidovudine (3'-azido-3'-deoxythymidine, AZT) from individuals with acquired immunodeficiency syndrome (AIDS) or AIDS-related complex were studied to determine the genetic basis of their resistance. Most were sequential isolates obtained at the initiation of and during therapy. Comparative nucleotide sequence analysis of the reverse transcriptase (RT) coding region from five pairs of sensitive and resistant isolates identified three predicted amino acid substitutions common to all the resistant strains (Asp67----Asn, Lys70----Arg, Thr215----Phe or Tyr) plus a fourth in three isolates (Lys219----Gln). Partially resistant isolates had combinations of these four changes. An infectious molecular clone constructed with these four mutations in RT yielded highly resistant HIV after transfection of T cells. The reproducible nature of these mutations should make it possible to develop rapid assays to predict zidovudine resistance by performing polymerase chain reaction amplification of nucleic acid from peripheral blood lymphocytes, thereby circumventing current lengthy HIV isolation and sensitivity testing.