予言Iナトリウム利尿ペプチド前駆体Cによって媒介されたマウス卵母細胞の停止には、胞状卵胞および累積卵細胞複合体のGJA1（コネキシン-43）およびGJA4（コネキシン-37）ギャップジャンクションが必要です。

完全に成長した胚の小胞期マウス卵母細胞は、排卵まで減数分裂前の予言で逮捕されたままです。この逮捕は、卵母細胞を囲む核顆粒膜細胞で生成されたCGMPによって維持されています。最近、核細胞におけるCGMP産生は、そのリガンドナトリウム利尿ペプチド前駆体C（NPPC）によって活性化されたNPR2グアニル酸シクラーゼに依存することがわかった。CGMPは、群顆粒細胞を互いに卵母細胞に結合するギャップジャンクションを通して卵母細胞に到達すると想定されています。以前の研究では、卵胞の2つの主要なギャップジャンクション、顆粒膜細胞とコネキシン-37ギャップジャンクション（GJA1タンパク質）のコネキシン-43ギャップジャンクション（GJA1タンパク質）が積雲と卵母細胞間の間のコネキシン-37ギャップジャンクション（GJA4）を特定しました。しかし、NPPC/NPR2シグナル伝達によって媒介される減数分裂停止には両方のタイプが必要であることは確立されていませんでした。これを調査するために、培養中の積球体卵母細胞錯体（COC）および分離された胞状卵胞内のギャップ接合アイソフォームを特異的に破壊するコネキシン模倣ペプチド（CMP）を使用しました。さらに、私たちは、それ以外の場合は無傷の卵胞内の胞状空洞へのCMPアクセスを許可するために、穿刺された胞状卵胞調製を開発しました。Connexin-43（CX43 CMP）に対応したCMPは、単離されたCOCと胞状卵胞の両方でNPPCを介した減数分裂停止を克服しました。対照的に、CX37 CMPは培地に存在する場合は効果がありませんでしたが、COCSの卵母細胞表面近くのペリビテリン空間にマイクロインジェクションしたときにNPPCの存在下で卵母細胞停止を放出しました。これは、減数分裂停止に必要なコネキシンアイソフォームと、卵母細胞全体でのコネキシン-43の報告された局在化と卵母細胞表面のコネキシン-37の両方と一致しています。

Fully grown germinal vesicle stage mouse oocytes remain arrested in meiotic prophase I until ovulation. This arrest is maintained by cGMP produced in cumulus granulosa cells surrounding the oocyte. Recently, it was found that cGMP production in cumulus cells depends on NPR2 guanylate cyclase activated by its ligand natriuretic peptide precursor C (NPPC). It is assumed that cGMP reaches the oocyte through gap junctions that couple cumulus granulosa cells to each other and to the oocyte. Previous work identified two main types of gap junctions in the follicle, connexin-43 gap junctions (GJA1 protein) between granulosa cells and connexin-37 gap junctions (GJA4) between cumulus cells and the oocyte. However, it had not been established that both types are required for meiotic arrest mediated by NPPC/NPR2 signaling. To investigate this, we used connexin mimetic peptides (CMPs) that specifically disrupt gap junction isoforms within cumulus-oocyte complexes (COCs) and isolated antral follicles in culture. We furthermore developed a punctured antral follicle preparation to permit CMP access to the antral cavity in an otherwise intact follicle. CMP directed against connexin-43 (Cx43 CMP) overcame NPPC-mediated meiotic arrest in both isolated COCs and antral follicles. Cx37 CMP, in contrast, had no effect when present in the medium, but released oocyte arrest in the presence of NPPC when microinjected into the perivitelline space near the oocyte surface in COCs. This is consistent with both connexin isoforms being required for meiotic arrest and with the reported localization of connexin-43 throughout the cumulus cells and connexin-37 at the oocyte surface.