肝細胞における胆汁酸輸送体およびB型肝炎ウイルス受容体Na+/タウロコール酸コトロコロートポリペプチド（NTCP）の速度論

バックグラウンドと目的：ヒト肝臓胆汁酸輸送体Na（+）/タウロコール酸コトロコレートポリペプチド（NTCP）は、最近、Myr-Pres11（Myr-Pres11）を介して付着する肝炎ウイルス（HBV）の感染のための肝臓特異的受容体として同定されています。）NTCPに対するその大きな表面タンパク質のペプチドドメイン。MYR-PRES1ペプチドのNTCPへの結合はHBV感染の開始ステップであるため、このプロセスがNTCPの生理学的胆汁酸輸送機能を妨げるかどうかを調査しました。 方法：HBV感染、MYR-PRES1ペプチド結合、および胆汁酸輸送アッセイは、原発性Tupaia Belangeri（PTH）およびヒト（PHH）肝細胞、およびNTCPをトランスフェクトしたHepG2細胞を使用して、NTCPの発現を調節したNTCPの発現を可能にします。さまざまな胆汁酸、エゼチミブ、およびMyr-Pres1ペプチド。 結果：HBVのMYR-PRES1ペプチドは、PTHおよびPHHおよびNTCP発現HEK293およびHEPG2細胞の胆汁酸輸送を阻害しました。逆に、PTH、PHH、およびNTCPトランスフェクトされたHEPG2細胞のHBV感染は、チョリン酸とウルソデオキシコール酸のタウリンとグリシンコンジュゲート、ならびにエゼチミベによって濃度依存的に阻害されました。NTCP-HEPG2細胞およびPTH、NTCP発現、NTCP輸送機能、Myr-Pres1ペプチド結合、およびHBV感染は同等の速度論に続きました。 結論：生産的HBV感染に必要なNTCPへのMyr-Pres1ウイルス結合は、NTCPの生理学的胆汁酸輸送機能を妨げます。したがって、NTCPを介したHBV感染は、NTCP基質およびNTCP阻害薬によってロック可能である可能性があります。これにより、NTCP指向の薬物を使用することにより、HBV感染を効率的に管理するためのまったく新しい方法が開かれます。

BACKGROUND & AIMS: The human liver bile acid transporter Na(+)/taurocholate cotransporting polypeptide (NTCP) has recently been identified as liver-specific receptor for infection of hepatitis B virus (HBV), which attaches via the myristoylated preS1 (myr-preS1) peptide domain of its large surface protein to NTCP. Since binding of the myr-preS1 peptide to NTCP is an initiating step of HBV infection, we investigated if this process interferes with the physiological bile acid transport function of NTCP. METHODS: HBV infection, myr-preS1 peptide binding, and bile acid transport assays were performed with primary Tupaia belangeri (PTH) and human (PHH) hepatocytes as well as NTCP-transfected human hepatoma HepG2 cells allowing regulated NTCP expression, in the presence of various bile acids, ezetimibe, and myr-preS1 peptides. RESULTS: The myr-preS1 peptide of HBV inhibited bile acid transport in PTH and PHH as well as in NTCP-expressing HEK293 and HepG2 cells. Inversely, HBV infection of PTH, PHH, and NTCP-transfected HepG2 cells was inhibited in a concentration-dependent manner by taurine and glycine conjugates of cholic acid and ursodeoxycholic acid as well as by ezetimibe. In NTCP-HepG2 cells and PTH, NTCP expression, NTCP transport function, myr-preS1 peptide binding, and HBV infection followed comparable kinetics. CONCLUSIONS: Myr-preS1 virus binding to NTCP, necessary for productive HBV infection, interferes with the physiological bile acid transport function of NTCP. Therefore, HBV infection via NTCP may be lockable by NTCP substrates and NTCP-inhibiting drugs. This opens a completely new way for an efficient management of HBV infection by the use of NTCP-directed drugs.