子宮内膜症におけるエピガロカテキン-3ガレートの抗線維性特性

研究の質問：エピガロカテキン-3-ガレート（EGCG）治療は、子宮内膜症の線維症の治療に有効ですか？ 概要回答：EGCGは、子宮内膜症に抗線維性特性を持っているようです。 すでに知られていること：組織学的に、子宮内膜症は、子宮内膜と間質を囲む密な線維組織によって特徴付けられます。しかし、これまでには、子宮内膜症関連の線維症の候補者の新しい治療法を評価した研究はわずかです。 研究デザイン、サイズ、期間：この実験室研究では、正常な月経周期を伴う生殖年齢の55人の患者（子宮内膜症のない45人、子宮内膜症のない10人）のサンプルを分析しました。合計40個のヌードマウスが、合計10個のサンプルから単一注射の増殖性子宮内膜断片を受けました。 参加者/材料、設定、方法：線維性マーカーに対するEGCGおよびN-アセチル-L-チェステインのin vitro効果（アルファスムザの筋肉アクチン、タイプIコラーゲン、結合組織成長因子、フィブロネクチン）を形質転換成長因子（TGF）-β1刺激、および細胞増殖、移動および浸潤、および子宮内膜および子宮内膜間質細胞のコラーゲンゲル収縮は、リアルタイムPCR、免疫細胞化学、細胞増殖アッセイ、in vitro移動および侵入アッセイおよび/またはコラーゲンンゼンによって評価されました。ゲル収縮アッセイ。子宮内膜および子宮内膜間質細胞におけるマイトジェン活性化プロテインキナーゼ（MAPK）およびSMADシグナル伝達経路に対するEGCGのin vitro効果は、ウエスタンブロッティングによって評価されました。さらに、子宮内膜インプラントに対するEGCG治療の効果は、免疫不全ヌードマウスの子宮内膜症の異種移植モデルで評価されました。 主な結果と偶然の役割：EGCGによる治療は、子宮内膜症患者からの子宮内膜および子宮内膜間質細胞の細胞増殖、移動、および浸潤を有意に阻害しました。さらに、EGCG処理により、子宮内膜および子宮内膜間質細胞の両方で、線維性マーカーのmRNA発現のTGF-β1依存性の増加が大幅に減少しました。子宮内膜および子宮内膜間質細胞媒介コラーゲンゲルの収縮の両方は、EGCGでの治療後8、12、24時間で有意に減衰しました。エピガロカテキン-3-ガレートは、子宮内膜および子宮内膜間質細胞のMAPKおよびSMADシグナル伝達経路のTGF-β1刺激経路の活性化も有意に阻害しました。動物実験により、EGCGは子宮内膜症における線維症の進行を防ぐことが示されました。 制限、注意の理由：薬物候補としてのエピガロカテキン-3ガレートの魅力は、その比較的低いバイオアベイラビリティによって減少しています。しかし、EGCG分子の多数の変化が特許を取得しています。これは、天然化合物の完全性を改善するか、より安定しているが同様の効果的な分子を生成します。したがって、EGCGおよびその誘導体、類似体、およびプロドラッグは、子宮内膜症の将来の治療および/または予防のために、潜在的に薬剤に発達する可能性があります。 調査結果の幅広い意味：エピガロカテキン-3-ガレートは、子宮内膜症の治療および/または予防の潜在的な薬物候補です。 研究の資金/競合する利益：この研究は、カール・ストーツ内視鏡検査＆GmbH（ドイツ、Tuttlingen）によって部分的にサポートされていました。競合する利益は宣言されていません。

STUDY QUESTION: Is epigallocatechin-3-gallate (EGCG) treatment effective in the treatment of fibrosis in endometriosis? SUMMARY ANSWER: EGCG appears to have antifibrotic properties in endometriosis. WHAT IS KNOWN ALREADY: Histologically, endometriosis is characterized by dense fibrous tissue surrounding the endometrial glands and stroma. However, only a few studies to date have evaluated candidate new therapies for endometriosis-associated fibrosis. STUDY DESIGN, SIZE, DURATION: For this laboratory study, samples from 55 patients (45 with and 10 without endometriosis) of reproductive age with normal menstrual cycles were analyzed. A total of 40 nude mice received single injection proliferative endometrial fragments from a total of 10 samples. PARTICIPANTS/MATERIALS, SETTING, METHODS: The in vitro effects of EGCG and N-acetyl-l-cysteine on fibrotic markers (alpha-smooth muscle actin, type I collagen, connective tissue growth factor and fibronectin) with and without transforming growth factor (TGF)-β1 stimulation, as well as on cell proliferation, migration and invasion and collagen gel contraction of endometrial and endometriotic stromal cells were evaluated by real-time PCR, immunocytochemistry, cell proliferation assays, in vitro migration and invasion assays and/or collagen gel contraction assays. The in vitro effects of EGCG on mitogen-activated protein kinase (MAPK) and Smad signaling pathways in endometrial and endometriotic stromal cells were evaluated by western blotting. Additionally, the effects of EGCG treatment on endometriotic implants were evaluated in a xenograft model of endometriosis in immunodeficient nude mice. MAIN RESULTS AND THE ROLE OF CHANCE: Treatment with EGCG significantly inhibited cell proliferation, migration and invasion of endometrial and endometriotic stromal cells from patients with endometriosis. In addition, EGCG treatment significantly decreased the TGF-β1-dependent increase in the mRNA expression of fibrotic markers in both endometriotic and endometrial stromal cells. Both endometriotic and endometrial stromal cell-mediated contraction of collagen gels were significantly attenuated at 8, 12 and 24 h after treatment with EGCG. Epigallocatechin-3-gallate also significantly inhibited TGF-β1-stimulated activation of MAPK and Smad signaling pathways in endometrial and endometriotic stromal cells. Animal experiments showed that EGCG prevented the progression of fibrosis in endometriosis. LIMITATIONS, REASONS FOR CAUTION: The attractiveness of epigallocatechin-3-gallate as a drug candidate has been diminished by its relatively low bioavailability. However, numerous alterations to the EGCG molecule have been patented, either to improve the integrity of the native compound or to generate a more stable yet similarly efficacious molecule. Therefore, EGCG and its derivatives, analogs and prodrugs could potentially be developed into agents for the future treatment and/or prevention of endometriosis. WIDER IMPLICATIONS OF THE FINDINGS: Epigallocatechin-3-gallate is a potential drug candidate for the treatment and/or prevention of endometriosis. STUDY FUNDING/COMPETING INTERESTS: This study was supported in part by Karl Storz Endoscopy & GmbH (Tuttlingen, Germany). No competing interests are declared.