ラット/マウスのキメラ抗体の一致したセットラットH鎖定数領域MU、ガンマ1、ガンマ2B、ガンマ2C、エプシロン、およびアルファの一致したセット

ラットC領域MU、ガンマ1、ガンマ2A、ガンマ2B、ガンマ2C、エプシロン、およびアルファは、キメラ抗体技術によって特徴付けられています。ラット/マウスAg特異的（抗4-ヒドロキシ-3-ニトロフェナセチル）抗体のセットは、H鎖定数領域でのみ異なるが、同一のV領域とL鎖を運ぶマウス起源である同一のV領域とL鎖を運びます。すべてのラット定数領域は発現し、M.W。タンパク質配列から予想どおりでした。IgGサブクラス内の移動性のわずかな変動により、4つのガンマHチェーンのサイズの階層を確立することができました。ガンマ2bよりも大きいガンマ2cより大きいガンマ2aより大きい。ラットIgG2CとIgG2bはタンパク質Aとタンパク質Gの両方で精製できますが、ラットIgG2Aはタンパク質Gでのみ精製できました。ラットIgMとIgG2BはCを介した溶血で最も強力でした。これは、IgG2CがC1Qを効率的にバインドしたが、細胞溶解が比較的低かったため、C1Qバインドの量の結果ではありませんでした。ヒトエフェクターおよび標的細胞を使用したADCCでは、IgG2BとIgG1が最も効果的でした。

Rat C regions mu, gamma 1, gamma 2a, gamma 2b, gamma 2c, epsilon, and alpha have been characterized by means of chimeric antibody technology. A set of rat/mouse Ag-specific (anti-4-hydroxy-3-nitrophenacetyl) antibodies was constructed that differ only in the H chain constant region but carry identical V region and L chain, both of which are of mouse origin. All rat constant regions could be expressed and m.w. were as expected from the protein sequence. A slight variation in mobility within the IgG subclasses allowed us to establish a hierarchy for the sizes of the four gamma H chains; gamma 2b greater than gamma 1 greater than gamma 2c greater than gamma 2a. Rat IgG2c and IgG2b could be purified on both protein A and protein G while rat IgG2a could only be purified on protein G. Rat IgM and IgG2b were the most potent in C-mediated hemolysis. This was not simply a consequence of the amount of C1q bound because IgG2c bound C1q efficiently but was relatively poor in cell lysis. In ADCC using human effector and target cells, IgG2b and IgG1 were the most effective.