nエンドルールの普遍性と構造

私たちの以前の研究は、酵母Saccharomyces cerevisiaeで、8つの安定化アミノ末端残基のいずれかが、テストタンパク質ベータガラクトシダーゼ（ベータGAL）で長い（20時間以上）半減期を付与するのに対し、12がアミノのアミノのハーフライフを付与することを示しています。- 末端残基は、ベータギャルの半減期に3分から30分未満に付与します。ここで、類似の単一耐節コード（Nエンドルール）が哺乳類の網状赤血球に由来するin vitroシステムで動作することを示しています。また、nェンドルールには階層構造があることも示します。具体的には、アミノ末端GluとASP（および網状細胞のCYS）は、ARGなどの主要な不安定化残基に共役する能力を通じて不安定化するという点で、二次不安定な残基です。アミノ末端GLNとASNは、選択的な脱アミド化を介して、二次不安定な残留物GluとASPに変換される能力を介して不安定化するという点で、三次の不安定な残留物です。さらに、網状赤血球では、NENDを認識する活性の異なるタイプは、基本（Arg、Lys、His）、かさばる疎水性（Phe、Leu、Trp、Tyr）、および、および、3つのクラスの主要な不安定な残留物に特異的であることが示されています。小さな非荷電（ala、ser、thr）。網状赤血球におけるn末ルールの特徴は、n末ルールの正確な形態が細胞の生理学的状態に依存し、それによって細胞分化時の既存のタンパク質の選択的破壊のメカニズムを提供する可能性があることを示唆しています。

Our previous work has shown that, in the yeast Saccharomyces cerevisiae, any of the eight stabilizing amino-terminal residues confers a long (greater than 20 h) half-life on a test protein beta-galactosidase (beta gal), whereas 12 destabilizing amino-terminal residues confer on beta gal half-lives from less than 3 min to 30 min. We now show that an analogous single-residue code (the N-end rule) operates in an in vitro system derived from mammalian reticulocytes. We also show that the N-end rule has a hierarchical structure. Specifically, amino-terminal Glu and Asp (and also Cys in reticulocytes) are secondary destabilizing residues in that they are destabilizing through their ability to be conjugated to primary destabilizing residues such as Arg. Amino-terminal Gln and Asn are tertiary destabilizing residues in that they are destabilizing through their ability to be converted, via selective deamidation, into secondary destabilizing residues Glu and Asp. Furthermore, in reticulocytes, distinct types of the N-end-recognizing activity are shown to be specific for three classes of primary destabilizing residues: basic (Arg, Lys, His), bulky hydrophobic (Phe, Leu, Trp, Tyr), and small uncharged (Ala, Ser, Thr). Features of the N-end rule in reticulocytes suggest that the exact form of the N-end rule may depend on the cell's physiological state, thereby providing a mechanism for selective destruction of preexisting proteins upon cell differentiation.