LC-MS/MSによる全血および血漿中のΔ9-テトラヒドロカンナビノール酸A（Δ9-THCA-A）の測定および大麻の影響下で運転している疑いのあるドライバーからの本物のサンプルへの応用

デルタ-9-テトラヒドロカンナビノール酸A（THCA-A）は、大麻植物におけるDelta-9-Tetrahydrocannabinol（THC）の生合成前駆体であり、向精神的効果はありません。THCA-Aは血液と尿で検出でき、いくつかの代謝物が特定されています。THCA-Aはまた、髪に髪に組み込まれていることが示されていますが、小川の範囲はわずかな程度までですが、血流や汗を介して組み込まれる可能性は低いようです。生物液中のTHCA -Aの検出は、純粋なTHCのみを含む処方THC薬の摂取量と、THC -ACID Aおよび他のカンナビノイド以外にTHCを含む大麻生成物のみを区別するためのマーカーとして機能する可能性があります。ただし、法医学的症例におけるその有用性に関する知識は非常に限られています。現在の研究の目的は、LC-MS/MSを使用したヒトの血液または血漿中のTHCA-A測定のための信頼できる方法の開発と、薬物の影響下での運転の症例への応用でした。58（58）の本物の全血とそれぞれのプラズマサンプルは、ベルン地域（スイス）からの大麻の影響下で運転している疑いのあるドライバーから収集されました。サンプルは、最初にTHC、11-OH-THC、およびTHC-COOHについてテストされ、次にTHCA-Aについてさらにテストされました。この目的のために、既存のLC-MS/MSメソッドが変更および検証され、1.0〜200Ng/mLの範囲で選択的で線形であることがわかりました（すべての検証実行では相関係数は0.9980を超えていました）。検出限界（LOD）および定量化制限（LOQ）は、それぞれ0.3ng/mlと1.0ng/mlでした。アッセイ内およびアッセイ間の精度は90％よりも等しく、またはそれ以上であり、アッセイ内およびアッセイ間精度は11.1％よりも等でした。平均抽出効率は、85.4％を超えると同等またはそれ以上の満足のいくものでした。THCA-Aは、3回の凍結/解凍サイクルと4°Cで7日間貯蔵した後、全血サンプルで安定していました。再注入（オートサンプラー）安定性も満足のいくものでした。THCは、0.7〜51ng/mlの範囲のレベルを持つすべての血液サンプルに存在していました。THCA-A濃度は、血液サンプルでは1.0〜496ng/ml、血漿サンプルでは1.4〜824ng/mlの範囲でした。プラズマ：血液分配係数の平均値は1.7（±0.21、SD）でした。警察のプロトコルに記載されている中毒または障害の程度または健康診断の報告、および血液中の検出されたTHCA-a濃度との間には、相関関係は見つかりませんでした。

Delta-9-tetrahydrocannabinolic acid A (THCA-A) is the biosynthetic precursor of delta-9-tetrahydrocannabinol (THC) in cannabis plants, and has no psychotropic effects. THCA-A can be detected in blood and urine, and several metabolites have been identified. THCA-A was also shown to be incorporated in hair by side stream smoke to a minor extent, but incorporation via blood stream or sweat seems unlikely. The detection of THCA-A in biological fluids may serve as a marker for differentiating between the intake of prescribed THC medication - containing only pure THC - and cannabis products containing THC besides THC-acid A and other cannabinoids. However, the knowledge about its usefulness in forensic cases is very limited. The aim of the present work was the development of a reliable method for THCA-A determination in human blood or plasma using LC-MS/MS and application to cases of driving under the influence of drugs. Fifty eight (58) authentic whole blood and the respective plasma samples were collected from drivers suspected of driving under the influence of cannabis from the region of Bern (Switzerland). Samples were first tested for THC, 11-OH-THC and THC-COOH, and then additionally for THCA-A. For this purpose, the existing LC-MS/MS method was modified and validated, and found to be selective and linear over a range of 1.0 to 200ng/mL (the correlation coefficients were above 0.9980 in all validation runs). Limit of detection (LOD) and limit of quantification (LOQ) were 0.3ng/mL and 1.0ng/mL respectively. Intra- and inter-assay accuracy were equal or better than 90% and intra- and inter-assay precision were equal or better than 11.1%. The mean extraction efficiencies were satisfactory being equal or higher than 85.4%. THCA-A was stable in whole blood samples after 3 freeze/thaw cycles and storage at 4°C for 7 days. Re-injection (autosampler) stability was also satisfactory. THC was present in all blood samples with levels ranging from 0.7 to 51ng/mL. THCA-A concentrations ranged from 1.0 to 496ng/mL in blood samples and from 1.4 to 824ng/mL in plasma samples. The plasma:blood partition coefficient had a mean value of 1.7 (±0.21, SD). No correlation was found between the degree of intoxication or impairment stated in the police protocols or reports of medical examinations and the detected THCA-A-concentration in blood.