歯周靭帯細胞におけるエンドカンナビノイドと炎症反応

エンドカンナビノイドは、いくつかの組織の複数の調節機能に関連しています。主要なエンドカンナビノイド、アナンダミド（AEA）および2-アラキドニルグリセロール（2-AG）は、歯周炎患者の歯肉硬化液液で検出されていますが、歯周病またはヒト歯周靭帯細胞（HPDLC）とエンドカンナビノイドとの関連はまだ不明です。本研究の目的は、ポルフィロモナス歯肉症リポ糖（P. gingivalis LPS）の存在/存在下でのHPDLCの増殖/生存率とサイトカイン/ケモカイン産生に対するAEAおよび2-AGの効果を調べることでした。HPDLCSの増殖/生存率は、3,4,5-ジメチルチアゾール-2-Ill-2,5-ジフェニルテトラゾリウムブロマイド（MTT）アッセイを使用して測定されました。インターロイキン-6（IL-6）、インターロイキン-8（IL-8）、および単球走化性タンパク質-1（MCP-1）レベルを、それぞれリアルタイムPCRおよびELISAによって遺伝子発現およびタンパク質レベルで調べました。AEAおよび2-AGは、P。gingivalisLPSがない場合、HPDLCの増殖/生存率に対する有意な影響を明らかにしませんでした。ただし、P。gingivalis LPS（1 µg/ml）の存在下で、HPDLCS生存率は10〜20 µM AEAの大幅に増加しました。P. gingivalis LPSがない場合、AEAおよび2-AGはHPDLCでのIL-8およびMCP-1発現の発現に有意な効果を示しませんでしたが、IL-6発現は10 µM 2-AGによってわずかに増強され、AEAの影響を受けませんでした。P.gingivalisでは、LPSがHPDLCを刺激し、10 µM AEAのダウンレギュレーション遺伝子発現とIL-6、IL-8、およびMCP-1のタンパク質産生。対照的に、10 µM 2-AGは反対の効果があり、P。gingivalisLPSがHPDLCを刺激したP. gingivalis LPSにおけるMCP-1の遺伝子発現と同様に、IL-6およびIL-8の遺伝子およびタンパク質発現の有意なアップレギュレーションを誘導しました。我々のデータは、AEAが抗炎症性および免疫抑制効果がp.gingivalis LPSに対するhPDLCの宿主反応にあるように見えることを示唆していますが、2-AGは有害な炎症プロセスを促進しているようです。結論として、AEAと2-AGは、歯周炎症の変調において重要な役割を果たす可能性があります。

Endocannabinoids are associated with multiple regulatory functions in several tissues. The main endocannabinoids, anandamide (AEA) and 2-arachidonylglycerol (2-AG), have been detected in the gingival crevicular fluid of periodontitis patients, but the association between periodontal disease or human periodontal ligament cells (hPdLCs) and endocannabinoids still remain unclear. The aim of the present study was to examine the effects of AEA and 2-AG on the proliferation/viability and cytokine/chemokine production of hPdLCs in the presence/absence of Porphyromonas gingivalis lipopolysaccharide (P. gingivalis LPS). The proliferation/viability of hPdLCs was measured using 3,4,5-dimethylthiazol-2-yl-2,5-diphenyl tetrazolium bromide (MTT)-assay. Interleukin-6 (IL-6), interleukin-8 (IL-8), and monocyte chemotactic protein-1 (MCP-1) levels were examined at gene expression and protein level by real-time PCR and ELISA, respectively. AEA and 2-AG did not reveal any significant effects on proliferation/viability of hPdLCs in the absence of P. gingivalis LPS. However, hPdLCs viability was significantly increased by 10-20 µM AEA in the presence of P. gingivalis LPS (1 µg/ml). In the absence of P. gingivalis LPS, AEA and 2-AG did not exhibit any significant effect on the expression of IL-8 and MCP-1 expression in hPdLCs, whereas IL-6 expression was slightly enhanced by 10 µM 2-AG and not affected by AEA. In P.gingivalis LPS stimulated hPdLCs, 10 µM AEA down-regulated gene-expression and protein production of IL-6, IL-8, and MCP-1. In contrast, 10 µM 2-AG had an opposite effect and induced a significant up-regulation of gene and protein expression of IL-6 and IL-8 (P<0.05) as well as gene-expression of MCP-1 in P. gingivalis LPS stimulated hPdLCs. Our data suggest that AEA appears to have an anti-inflammatory and immune suppressive effect on hPdLCs' host response to P.gingivalis LPS, whereas 2-AG appears to promote detrimental inflammatory processes. In conclusion, AEA and 2-AG might play an important role in the modulation of periodontal inflammation.