IgE媒介ピーナッツアレルギーを診断するための超高感度炭水化物ペプチドSPRイメージングマイクロアレイ

ピーナッツアレルギーの重症度は、血液中のアレルゲン特異的免疫グロブリンE（IgE）抗体に関連していますが、糖タンパク質アレルゲン混合物を使用したアッセイからの診断は不正確です。アレルギー性タンパク質の個々のペプチドおよび炭水化物エピトープに特異的なIGEを測定することは有望です。ここでは、ペプチドと炭水化物の両方のエピトープを利用したIGEの最初の免疫アレイを報告します。表面プラズモン共鳴画像法（SPRI）マイクロアレイには、ペプチドとβ-シロシルグリコシド（BXG）エピトープが装備されていました。モノクローナル抗IGE抗体が陽性対照として含まれていました。IgEは、感度を高め、非特異的結合を最小限に抑えるために、ポリクローナル抗IGE抗体を搭載した磁気ビーズに事前処理されました。わずか0.1アトモール（0.5 pg ml（-1））IgEが45分で希釈血清から検出されました。ARA-H2ペプチドとBXGに結合するIgESを10μLの患者血清で定量化し、標準的な免疫抱き値と相関させました。

Severity of peanut allergies is linked to allergen-specific immunoglobulin E (IgE) antibodies in blood, but diagnostics from assays using glycoprotein allergen mixtures may be inaccurate. Measuring IgEs specific to individual peptide and carbohydrate epitopes of allergenic proteins is promising. We report here the first immunoarray for IgEs utilizing both peptide and carbohydrate epitopes. A surface plasmon resonance imaging (SPRi) microarray was equipped with peptide and β-xylosyl glycoside (BXG) epitopes from major peanut allergen glycoprotein Arachis hypogaea h2 (Ara-h2). A monoclonal anti-IgE antibody was included as positive control. IgEs were precaptured onto magnetic beads loaded with polyclonal anti-IgE antibodies to enhance sensitivity and minimize non-specific binding. As little as 0.1 attomole (0.5 pg mL(-1)) IgE was detected from dilute serum in 45 min. IgEs binding to Ara-h2 peptide and BXG were quantified in 10 μL of patient serum and correlated with standard ImmunoCAP values.