抑制性化された歯周靭帯細胞シートは、再塩化ポテンシャルを備えています

歯周靭帯は、歯周再生を促進する重要な組織です。この研究の目的は、その後の歯周組織工学用途のために、脱細胞化されたヒトの歯周靭帯細胞シートを製造することを目的としています。脱細胞化プロトコルは、無傷のヒト歯周靭帯細胞シートの溶融エレクトロスピンポリカプロラクトン膜への移動と、NH4OH/Triton X-100およびDNase溶液によるその後の双方向灌流を含みました。プロトコルは、DNA含有量の92％を除去することが示されました。脱細胞化細胞シートの構造的完全性は、コラーゲンの定量化アッセイ、ヒトコラーゲンI型およびフィブロネクチンの免疫染色、および走査型電子顕微鏡によって確認されました。ELISAを使用して、脱細胞化細胞シート構築物における残留塩基性線維芽細胞成長因子（BFGF）、血管内皮成長因子（VEGF）、および肝細胞成長因子（HGF）の存在を実証しました。脱細胞化された細胞シートは、同種のヒト歯周靭帯細胞による再塩化をサポートする能力を持っていることが示されました。この研究では、無傷の細胞外マトリックスと居住成長因子を保持し、同種細胞による再栄養をサポートできる脱細胞化された歯周靭帯細胞シートの製造について説明します。脱細胞化されたHPDLセルシートの概念は、将来の「既製の」歯周組織工学戦略で利用される可能性があります。

The periodontal ligament is the key tissue facilitating periodontal regeneration. This study aimed to fabricate decellularized human periodontal ligament cell sheets for subsequent periodontal tissue engineering applications. The decellularization protocol involved the transfer of intact human periodontal ligament cell sheets onto melt electrospun polycaprolactone membranes and subsequent bi-directional perfusion with NH4OH/Triton X-100 and DNase solutions. The protocol was shown to remove 92% of DNA content. The structural integrity of the decellularized cell sheets was confirmed by a collagen quantification assay, immunostaining of human collagen type I and fibronectin, and scanning electron microscopy. ELISA was used to demonstrate the presence of residual basic fibroblast growth factor (bFGF), vascular endothelial growth factor (VEGF), and hepatocyte growth factor (HGF) in the decellularized cell sheet constructs. The decellularized cell sheets were shown to have the ability to support recellularization by allogenic human periodontal ligament cells. This study describes the fabrication of decellularized periodontal ligament cell sheets that retain an intact extracellular matrix and resident growth factors and can support repopulation by allogenic cells. The decellularized hPDL cell sheet concept has the potential to be utilized in future "off-the-shelf" periodontal tissue engineering strategies.