GAXは、IGF-1誘導FAK/PYK2およびERK2協同経路によって媒介される血管性前脂肪細胞生体機能を阻害します

血管周囲脂肪細胞（PVAC）生体融合は心血管疾患と密接に関連していた。その特定の生物学的メカニズムは不明のままでした。血管細胞のPVAC関数を調整する方法は、重要なトピックです。本研究は、FAK/PYK2およびERK1/2 MAPKシグナル伝達経路がPVAC関数に関与しているかどうかを調査するために設計されました。これは、インスリン様成長因子1（IGF-1）によって活性化され、GAXによって阻害されます。血管周囲脂肪細胞から分離されたPVACを培養し、脱分化し、10nm IGF-Iで刺激しました。細胞機能実験により、IGF-1がPVACの増殖、接着、および移動を促進することが示されました。しかし、GAXはこれらの関数を介してIGF-1を介して弱体化しました。フローサイトメトリーは、IGF-1がS期のPVACパーセントを増加させ、G0/G1相およびアポトーシス細胞の割合を減少させることを実証しました。一方、GAXはS相細胞の割合を減少させ、G0-G1相およびアポトーシス細胞の割合を増加させました。ウエスタンブロッティングとRT-PCRは、IGF-1がFAK/PYK2およびERK1/2シグナル伝達経路を活性化し、FAK、PYK2、およびERK1/2のmRNAおよびタンパク質発現を上方制御し、p53発現を抑制したことを明らかにしました。逆に、GAXはこれらのシグナル伝達タンパク質の発現を下げ、p53発現を増加させました。したがって、IGF-1を媒介したFAK/PYK2およびERK1/2経路は、PVAC機能を増強しました。GAXは、IGF-1のこれらの効果を効果的に打ち、PVAC活性を抑制し、細胞アポトーシスを増加させました。我々の発見は、IGF-1によって媒介されるFAK/PYK2およびERK1/2協同組合の活性化がPVAC機能に不可欠であり、GAXはこれらのシグナル伝達経路を妨害し、PVAC機能を阻害する有望な候補遺伝子であることを示唆しました。

Perivascular adipocyte (PVAC) biofunctions were closely related to cardiovascular diseases; its specific biological mechanisms remained unclear. How to adjust PVAC functions of vascular cells is an important topic. The present study was designed to investigate whether FAK/Pyk2 and ERK1/2 MAPK signaling pathways participate in PVAC functions, which is activated by insulin-like growth factor 1(IGF-1) and inhibited by Gax. PVACs isolated from perivascular adipocyte were cultured, dedifferentiated, and stimulated with 10nM IGF-I. Cellular function experiments showed that IGF-1 promoted PVAC proliferation, adhesion, and migration. However Gax weakened IGF-1-mediated these function. Flow cytometry demonstrated that IGF-1 increased PVACs percent of S phase and decreased the percent of G0/G1 phase and apoptotic cells. While, Gax decreased the percent of S phase cells and increased those of G0-G1 phase and apoptotic cells. Western blotting and RT-PCR revealed that IGF-1 activated FAK/Pyk2 and ERK1/2 signaling pathways, upregulated the mRNA and protein expression of FAK, Pyk2, and ERK1/2, and suppressed p53 expression. Reversely, Gax lowered the expression of these signaling proteins and increased p53 expression. Therefore, IGF-1 mediated FAK/Pyk2 and ERK1/2 pathways to augment PVAC functions; Gax effectively counteracted these effects of IGF-1, repressed PVAC activities, and increased the cell apoptosis. Our findings suggested that FAK/Pyk2 and ERK1/2 cooperative activation mediated by IGF-1 is essential for PVAC functions, and Gax is a promising candidate gene to interfere with these signaling pathways and inhibit PVAC functions.