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onChocerciasisは、糸状の寄生虫onCoCocercaボルヴルスによる感染によって引き起こされる衰弱させる無視された熱帯疾患です。大人の虫は皮下組織に住んでおり、皮膚と目に移動する多数のミクロフィラリアを生成します。この病気は、昆虫の感染段階の幼虫に発達するミクロフィラリアの摂取後の属シミュリウム属の黒いハエによって拡散されます。現在、伝播は、黒いハエの捕獲と解剖と寄生虫の顕微鏡検査によって監視されているか、ポリメラーゼ連鎖反応を使用して黒いハエのプールに寄生虫DNAの存在を決定します。この研究では、ベクターブラックハエのO. bolvulus感染を検出するために、O。volvulus glutathione S-transferase1a（ovgst1a）をコードする新しいDNAバイオマーカーを特定しました。OVGST1Aベースのループ媒介等温増幅（LAMP）アッセイを開発しました。ここでは、特定の標的DNAの増幅が濁度またはヒドロキシナフトールブルーカラーの変化を使用して検出可能です。結果は、アッセイが敏感で迅速であり、60分以内に1ミクロフィラリア未満に相当するDNAを検出できることを示しました。このテストは、密接に関連した同所性牛の寄生虫onchocerca ochengiのDNAを使用して交差反応が検出されなかったため、ヒトの寄生虫に非常に特異的です。このテストには、オンコセルカ症のための大量薬物投与プログラムの実施の前後に、伝播の監視に使用するフィールドツールとしてさらに開発される可能性があります。
onChocerciasisは、糸状の寄生虫onCoCocercaボルヴルスによる感染によって引き起こされる衰弱させる無視された熱帯疾患です。大人の虫は皮下組織に住んでおり、皮膚と目に移動する多数のミクロフィラリアを生成します。この病気は、昆虫の感染段階の幼虫に発達するミクロフィラリアの摂取後の属シミュリウム属の黒いハエによって拡散されます。現在、伝播は、黒いハエの捕獲と解剖と寄生虫の顕微鏡検査によって監視されているか、ポリメラーゼ連鎖反応を使用して黒いハエのプールに寄生虫DNAの存在を決定します。この研究では、ベクターブラックハエのO. bolvulus感染を検出するために、O。volvulus glutathione S-transferase1a（ovgst1a）をコードする新しいDNAバイオマーカーを特定しました。OVGST1Aベースのループ媒介等温増幅（LAMP）アッセイを開発しました。ここでは、特定の標的DNAの増幅が濁度またはヒドロキシナフトールブルーカラーの変化を使用して検出可能です。結果は、アッセイが敏感で迅速であり、60分以内に1ミクロフィラリア未満に相当するDNAを検出できることを示しました。このテストは、密接に関連した同所性牛の寄生虫onchocerca ochengiのDNAを使用して交差反応が検出されなかったため、ヒトの寄生虫に非常に特異的です。このテストには、オンコセルカ症のための大量薬物投与プログラムの実施の前後に、伝播の監視に使用するフィールドツールとしてさらに開発される可能性があります。
Onchocerciasis is a debilitating neglected tropical disease caused by infection with the filarial parasite Onchocerca volvulus. Adult worms live in subcutaneous tissues and produce large numbers of microfilariae that migrate to the skin and eyes. The disease is spread by black flies of the genus Simulium following ingestion of microfilariae that develop into infective stage larvae in the insect. Currently, transmission is monitored by capture and dissection of black flies and microscopic examination of parasites, or using the polymerase chain reaction to determine the presence of parasite DNA in pools of black flies. In this study we identified a new DNA biomarker, encoding O. volvulus glutathione S-transferase 1a (OvGST1a), to detect O. volvulus infection in vector black flies. We developed an OvGST1a-based loop-mediated isothermal amplification (LAMP) assay where amplification of specific target DNA is detectable using turbidity or by a hydroxy naphthol blue color change. The results indicated that the assay is sensitive and rapid, capable of detecting DNA equivalent to less than one microfilaria within 60 minutes. The test is highly specific for the human parasite, as no cross-reaction was detected using DNA from the closely related and sympatric cattle parasite Onchocerca ochengi. The test has the potential to be developed further as a field tool for use in the surveillance of transmission before and after implementation of mass drug administration programs for onchocerciasis.
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