MMU-MIR-615-3Pは、C/EBPの相同タンパク質を阻害することにより脂肪症を調節します

パルミチン酸塩などの過剰な飽和した遊離脂肪酸が原因で発生するリポアポトーシスは、非アルコール性脂肪肝疾患の開始における重要な病原性イベントです。細胞のパルミチン酸塩負荷は、アポトーシス転写因子C/EBP相同タンパク質（CHOP）の誘導を含む小胞体網状体ストレス反応を活性化します。さらに、ミクロナの喪失は、小胞体（ER）ストレスの条件下でアポトーシスの調節に関係しています。この研究の目的は、パルミチン酸誘発ERストレス中にCHOP発現を調節する特定のマイクロRNAを特定することでした。肝細胞細胞株のパルミチン酸誘発性小胞体ストレス条件下で5つのミクロナが抑制されました（miR-92b-3p、miR-328-3p、miR-484、miR-574-5p、およびmiR-615-3p）。miR-615-3pは、それぞれRNAシーケンスとシリコ分析によって、パルミチン酸治療とCHOPタンパク質の発現を調節した候補のマイクロRNAとして特定しました。CHOP転写産物の3'Untranslisted領域（UTR）には、単一のmiR-615-3p結合部位があります。これは、レポーター遺伝子ベースのアッセイを使用して、機能的結合部位として特徴付けました。前駆体分子を使用したmiR-615-3pレベルの増強、抑制されたチョップ発現。これらの条件下では、パルミチン酸またはチュニカマイシン誘発細胞死が大幅に減少しました。我々の結果は、パルミチン酸誘発アポトーシスには、抑圧的なマイクロRNAであるmiR-615-3pのダウンレギュレーションを介して達成されるCHOPの最大発現が必要であることを示唆しています。miR-615-3pレベルの強化は、パルミチン酸誘発性肝細胞脂肪症を阻害することにより、治療上の利点がある可能性があると推測します。

Lipoapoptosis occurring due to an excess of saturated free fatty acids such as palmitate is a key pathogenic event in the initiation of nonalcoholic fatty liver disease. Palmitate loading of cells activates the endoplasmic reticulum stress response, including induction of the proapoptotic transcription factor C/EBP homologous protein (CHOP). Furthermore, the loss of microRNAs is implicated in regulating apoptosis under conditions of endoplasmic reticulum (ER) stress. The aim of this study was to identify specific microRNAs regulating CHOP expression during palmitate-induced ER stress. Five microRNAs were repressed under palmitate-induced endoplasmic reticulum stress conditions in hepatocyte cell lines (miR-92b-3p, miR-328-3p, miR-484, miR-574-5p, and miR-615-3p). We identified miR-615-3p as a candidate microRNA which was repressed by palmitate treatment and regulated CHOP protein expression, by RNA sequencing and in silico analyses, respectively. There is a single miR-615-3p binding site in the 3'untranslated region (UTR) of the Chop transcript. We characterized this as a functional binding site using a reporter gene-based assay. Augmentation of miR-615-3p levels, using a precursor molecule, repressed CHOP expression; and under these conditions palmitate- or tunicamycin-induced cell death were significantly reduced. Our results suggest that palmitate-induced apoptosis requires maximal expression of CHOP which is achieved via the downregulation of its repressive microRNA, miR-615-3p. We speculate that enhancement of miR-615-3p levels may be of therapeutic benefit by inhibiting palmitate-induced hepatocyte lipoapoptosis.