CD28およびCD3εに遺伝的にリンクされたTCRSは、内因性TCR鎖と誤って誤っていないため、増強されたT細胞の持続性と抗メラノーマ活性を媒介します

定義されたTCRを発現するように設計された遺伝子のT細胞の養子縁組は、腫瘍の患者に対する実現可能で有望な治療を表しています。ただし、TCR遺伝子治療は、転送されたT細胞の過渡的な存在と有効性によって妨げられます。これは、適切なT細胞共刺激によって改善されると予想されます。この記事では、CD28およびCD3ε（すなわち、TCR：28ε）にリンクされた新規2鎖TCRの識別と特性評価を報告します。この修飾されたTCRは、ペプチド-MHCの結合の強化を示し、野生型TCRと比較してペプチドによる刺激後のT細胞機能の増強を媒介します。TCRの表面発現：28εはCD28の膜貫通ドメインに依存しますが、T細胞機能はCD28とCD3εの両方の細胞内ドメインに依存し、IL-2産生はCD28：LCK結合に依存します。TCR：28ε、しかし野生型TCRではなく28εは、一次ヒトT細胞の検出可能な免疫シナプスを誘導し、そのような免疫シナプスは、リン酸化LCKやERKなどの初期TCRシグナル伝達のTCRトランスゲンとマーカーの蓄積を大幅に増強することを示します。重要なことに、TCR：28εは、TCRの誤解の欠如と保存された特異性によって証明されるように、ターゲットの認識の兆候を示していません。特に、免疫能力マウスでTCR：28εをテストすると、再発が限られている大型黒色腫の退縮を伴うT細胞生存率の劇的な増加が観察されました。私たちのデータは、CD28を含むTCRトランスゲン、そしてそれによって免疫抑制環境でT細胞共刺激を提供する可能性があると主張しています。

Adoptive transfer of T cells that are gene engineered to express a defined TCR represents a feasible and promising therapy for patients with tumors. However, TCR gene therapy is hindered by the transient presence and effectiveness of transferred T cells, which are anticipated to be improved by adequate T cell costimulation. In this article, we report the identification and characterization of a novel two-chain TCR linked to CD28 and CD3ε (i.e., TCR:28ε). This modified TCR demonstrates enhanced binding of peptide-MHC and mediates enhanced T cell function following stimulation with peptide compared with wild-type TCR. Surface expression of TCR:28ε depends on the transmembrane domain of CD28, whereas T cell functions depend on the intracellular domains of both CD28 and CD3ε, with IL-2 production showing dependency on CD28:LCK binding. TCR:28ε, but not wild-type TCR, induces detectable immune synapses in primary human T cells, and such immune synapses show significantly enhanced accumulation of TCR transgenes and markers of early TCR signaling, such as phosphorylated LCK and ERK. Importantly, TCR:28ε does not show signs of off-target recognition, as evidenced by lack of TCR mispairing, as well as preserved specificity. Notably, when testing TCR:28ε in immune-competent mice, we observed a drastic increase in T cell survival, which was accompanied by regression of large melanomas with limited recurrence. Our data argue that TCR transgenes that contain CD28, and, thereby, may provide T cell costimulation in an immune-suppressive environment, represent candidate receptors to treat patients with tumors.