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Methods in molecular biology (Clifton, N.J.)20150101Vol.1208issue()

グルタチオンS-トランスフェラーゼの電気化学検出:酸化ストレスに対する細胞保護メカニズムの重要な酵素

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文献タイプ:
  • Journal Article
  • Research Support, Non-U.S. Gov't
概要
Abstract

酸化ストレスは、細胞の抗酸化能力が反応性酸素種(ROS)の過剰な産生をクリーニングすると減少すると発生します。いくつかのヒト疾患は、酸化ストレスの増加と関連しているようです。この点で、細胞に存在するGSHは、グルタチオンS-トランスフェラーゼ(GST)酵素を介してROSおよびその他の異物を中和することにより機能します。したがって、GSTの発現レベルは、毒性化学物質または生体異物化合物に対する細胞の感度を決定する重要な要因です。したがって、GSTレベルの検出は、ROS関連疾患の臨床診断において基本的です。ここでは、ヒト細胞のGSTレベルの選択的検出に適用できるフェロセン基(電気化学プローブとして使用)のボルタンメトリック特性に基づいた方法論について説明します。測定された電気化学信号は、この酵素のgおよびh部位とフェロセニルGSH誘導体の特定の相互作用に関連付けられています。

酸化ストレスは、細胞の抗酸化能力が反応性酸素種(ROS)の過剰な産生をクリーニングすると減少すると発生します。いくつかのヒト疾患は、酸化ストレスの増加と関連しているようです。この点で、細胞に存在するGSHは、グルタチオンS-トランスフェラーゼ(GST)酵素を介してROSおよびその他の異物を中和することにより機能します。したがって、GSTの発現レベルは、毒性化学物質または生体異物化合物に対する細胞の感度を決定する重要な要因です。したがって、GSTレベルの検出は、ROS関連疾患の臨床診断において基本的です。ここでは、ヒト細胞のGSTレベルの選択的検出に適用できるフェロセン基(電気化学プローブとして使用)のボルタンメトリック特性に基づいた方法論について説明します。測定された電気化学信号は、この酵素のgおよびh部位とフェロセニルGSH誘導体の特定の相互作用に関連付けられています。

Oxidative stress arises when the antioxidant capacity of cells to clean the excess production of reactive oxygen species (ROS) decreases. Several human diseases seem to be related with an increment in the oxidative stress. In this regard, GSH present in the cells works by neutralizing ROS and other xenobiotics through the glutathione S-transferase (GST) enzyme. Thus, the level of expression of GST is an important factor in determining the sensitivity of cells to toxic chemicals or xenobiotic compounds. Therefore, the detection of GST levels is fundamental in the clinical diagnosis of ROS-related diseases. Here, we describe a methodology, based on the voltammetric properties of the ferrocene group (used as electrochemical probe), which can be applied for selective detection of GST levels in human cells. The electrochemical signal measured is associated to the specific interaction of a ferrocenyl-GSH derivate with the G- and H-sites of this enzyme.

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